有關抗原抗體反應重點敘述
抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行,也可以在機體外進行。抗原抗體反應的過程是經過一系列的化學和物理變化,包括抗原抗體特異性結合和非特異性促凝聚兩個階段,以及由親水膠體轉為疏水膠體的變化。由(you)于抗體主要(yao)存在于血(xue)清中(zhong),在抗原(yuan)或抗體檢測中(zhong)多以血(xue)清為(wei)試驗(yan)材(cai)料,故(gu)將體外抗原(yuan)抗體的免疫學(xue)反應也稱作血(xue)清學(xue)反應(serological reaction)。
一(yi)、抗(kang)原(yuan)抗(kang)體反(fan)應反(fan)應原(yuan)理:
抗(kang)(kang)體能(neng)特(te)異性(xing)地識別(bie)相應(ying)的(de)抗(kang)(kang)原,并與之結(jie)合(he)(he)。這(zhe)(zhe)種結(jie)合(he)(he)在體外也能(neng)發生,這(zhe)(zhe)種特(te)性(xing)就是(shi)許(xu)多免疫(yi)檢(jian)測(ce)方法的(de)基礎。抗(kang)(kang)原與抗(kang)(kang)體相互作用(yong)是(shi)非共價的(de),可逆的(de),其特(te)性(xing)符(fu)合(he)(he)許(xu)多化學反應(ying)的(de)基本(ben)原理。但因為抗(kang)(kang)體分(fen)子的(de)結(jie)構(gou)特(te)點,以(yi)及抗(kang)(kang)原分(fen)子結(jie)構(gou)的(de)多樣性(xing),使抗(kang)(kang)原抗(kang)(kang)體結(jie)合(he)(he)反應(ying)表現出(chu)復(fu)雜(za)性(xing) 。
交叉反(fan)應:
抗(kang)(kang)體(ti)特異(yi)性(xing)與(yu)(yu)交叉反(fan)(fan)應(ying):抗(kang)(kang)體(ti)是特異(yi)的(de)(de)。只(zhi)與(yu)(yu)相應(ying)抗(kang)(kang)原反(fan)(fan)應(ying)。實際制備的(de)(de)抗(kang)(kang)體(ti)卻常有非特異(yi)性(xing)反(fan)(fan)應(ying),這是因為抗(kang)(kang)原不(bu)純造成的(de)(de)。多組分抗(kang)(kang)原之間存在(zai)共同(tong)(tong)的(de)(de)抗(kang)(kang)原決(jue)定簇,或(huo)者兩(liang)個抗(kang)(kang)原決(jue)定簇結構(gou)類似能與(yu)(yu)同(tong)(tong)一抗(kang)(kang)體(ti)結合,均可出現抗(kang)(kang)體(ti)與(yu)(yu)異(yi)源抗(kang)(kang)原的(de)(de)交叉反(fan)(fan)應(ying)。用(yong)瓊脂雙擴散能簡便直觀地反(fan)(fan)映不(bu)同(tong)(tong)抗(kang)(kang)原與(yu)(yu)同(tong)(tong)一抗(kang)(kang)血(xue)(xue)清,或(huo)不(bu)同(tong)(tong)抗(kang)(kang)血(xue)(xue)清與(yu)(yu)同(tong)(tong)一抗(kang)(kang)原的(de)(de)交叉反(fan)(fan)應(ying)。
二、抗(kang)原抗(kang)體反應(ying)反應(ying)特(te)點(dian):
抗(kang)原抗(kang)體(ti)反應的特點主要有四性(xing):即(ji)特異(yi)性(xing)、比(bi)例(li)性(xing)、可逆性(xing),階段性(xing)。
1、特異性: 是抗原抗體反應的最主要特征,這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區之間空間結構的互補性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應用。隨著免疫學技術的發展進步,還將在醫學和生物學領域得到更加深入和廣泛的應用,比如腫瘤的診斷和特異性治療等。
2、比例性: 是指抗(kang)原與抗(kang)體(ti)發生可見反應(ying)需遵循一定的(de)量比(bi)關系,只有(you)當(dang)二者濃(nong)度比(bi)例(li)適(shi)當(dang)時才出現可見反應(ying),在抗(kang)原抗(kang)體(ti)比(bi)例(li)相當(dang)或抗(kang)原稍過剩的(de)情(qing)況下,反應(ying)最徹底,形成的(de)免疫復合(he)物沉(chen)淀(dian)最多、最大。而當(dang)抗(kang)原抗(kang)體(ti)比(bi)例(li)超過此范圍(wei)時,反應(ying)速(su)度和沉(chen)淀(dian)物量都會迅速(su)降低(di)甚至不出現抗(kang)原抗(kang)體(ti)反應(ying)。
3、可逆性: 是指抗原抗體結合形成復合物后,在一定條件下又可解離恢復為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反應是分子表面的非共價鍵結合,所形成的復合物并不牢固,可以隨時解離,解離后的抗原抗體仍保持原來的理化特征和生物學活性。
4、階段性:抗原抗體反應可分為兩個階段,第一個階段為抗原抗體的特異性結合階段,此階段是抗原與抗體間互補的非共價結合,反應迅速,可在數秒鐘至數分鐘內完成,一般不出現肉眼可見的反應現象。第二個階段為可見反應階段,是小的抗原抗體復合物間靠正、負電荷吸引形成較大復合物的過程。此階段反應慢,需要時間從數分鐘、數小時至數日不等,且易受多種因素和反應條件的影響 。
三、抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)反(fan)應(ying)影響因素:
1、電解質:抗原和抗體通常為蛋白質分子,等電點分別為pH 3~5和pH 5~6,在中性或:弱堿性的環境中,表面均帶負電荷,適當濃度的電解質會使他們失去一部分負電荷而相互結合,出現肉眼可見的凝集或沉淀現象:在抗原抗體反應中,常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液,以提供適當濃度的電解質。
2、溫(wen)度:抗(kang)(kang)(kang)(kang)原抗(kang)(kang)(kang)(kang)體反(fan)應(ying)必須在適(shi)宜的溫(wen)(wen)度(du)中(zhong)進行,一般為15~40℃,通常(chang)最適(shi)為37℃。一定范圍(wei)內(nei),溫(wen)(wen)度(du)升高,可促進抗(kang)(kang)(kang)(kang)原抗(kang)(kang)(kang)(kang)體分子問(wen)的碰撞機會,加速抗(kang)(kang)(kang)(kang)原抗(kang)(kang)(kang)(kang)體復合(he)(he)物的形成,加快可見(jian)反(fan)應(ying)的速度(du),若(ruo)溫(wen)(wen)度(du)高于(yu)56℃,可導致已結合(he)(he)的抗(kang)(kang)(kang)(kang)原抗(kang)(kang)(kang)(kang)體再解離(li),甚至(zhi)變性或(huo)破(po)壞;溫(wen)(wen)度(du)越低,結合(he)(he)速度(du)越慢,但結合(he)(he)牢固,易于(yu)觀察。某些特殊的抗(kang)(kang)(kang)(kang)原抗(kang)(kang)(kang)(kang)體反(fan)應(ying),對(dui)反(fan)應(ying)溫(wen)(wen)度(du)有(you)特殊要求(qiu),如冷凝集(ji)素(su)在4℃左右與紅細(xi)胞結合(he)(he)最好,20℃以上反(fan)而(er)解離(li)。
3、酸堿度:抗原抗體反應必須在合適的酸堿度環境中進行,pH過高或過低都將影響抗原:抗體的理化性質,抗原抗體反應的最適酸堿度為pH 6~8。此外,當pH達到或接近顆粒性抗原的等電點時,即使沒有相應抗體存在時,也會引起抗原非特異性凝集,即自凝,造成假陽性反應,嚴重影響試驗的可靠性。
三、