購買FAQ
問題:如(ru)果試(shi)劑的(de)體積(ji)很小,我該怎么辦?
回答:如果試劑(ji)的體(ti)積(ji)很小,請在(zai)使用(yong)前將試劑(ji)瓶離心,以確保試劑(ji)集中于(yu)瓶底。
問題:不按(an)指定的方(fang)法保存試(shi)劑可以(yi)嗎?
回答(da):不推(tui)薦,否(fou)則試劑(ji)的質量(liang)無法(fa)保證。
問題:可以將不同批(pi)號(hao)或試(shi)劑(ji)盒內的同一(yi)試(shi)劑(ji)混用嗎?
回答:不可以。
問題:在包被板(ban)使用前必須洗嗎?
回答:不(bu)是必(bi)須,但推(tui)薦使用,因(yin)為如果省略此(ci)步驟(zou)精(jing)確度可能會(hui)降(jiang)低。
問題:孵育時間延(yan)長或縮(suo)短(duan)可(ke)以嗎?
回答(da):孵育時間必須嚴格按照說明書操作,才能得到(dao)最佳的結果。
問(wen)題:實(shi)驗必(bi)須重復一次嗎?
回答:不必須(xu),但(dan)對于每(mei)個樣本和標準品建議做復孔(kong)。
問題(ti):貴公(gong)司的(de)ELISA試劑盒可以(yi)檢測哪些類型(xing)的(de)標本?
回答:我們的(de)大多數ELISA試(shi)劑盒(he)均適用于人的(de)血清(qing),血漿,細胞培(pei)養上(shang)清(qing)液和(he)(he)其它體液。在產品說明(ming)書和(he)(he)我們的(de)目錄上(shang)您(nin)會看到具(ju)體的(de)適用范圍。
問(wen)題:貴公司的(de)標(biao)準(zhun)與國際標(biao)準(zhun)相關(guan)嗎?
回答:我(wo)公司的下(xia)列產(chan)品(pin)與國(guo)際標準1:1相關
human IFN-γ Int. Referenz NIBSC 82/587 50pg = 1IU
human IL-2 Int. Referenz NIBSC 86/504 76pg = 1IU
human IL-5 Int. Referenz NIBSC 90/586 100pg = 1IU
human IL-6 Int. Referenz NIBSC 89/548 10pg = 1IU
human IL-10 Int. Referenz NIBSC 93/722 200pg = 1IU
human IL-12 Int. Referenz NIBSC 95/544 100pg = 1IU
human IL-13 Int. Referenz NIBSC 94/622 1ng = 1IU
human TNF-β Int. Referenz NIBSC 87/640 6.7pg = 1IU
murine IL-2 Int. Referenz NIBSC 93/566 10pg = 1IU
murine IL-4 Int. Referenz NIBSC 91/656 100pg = 1IU
murine IL-6 Int. Referenz NIBSC 93/730 10pg = 1IU
murine IL-10 Int. Referenz NIBSC 93/672 1pg = 1IU
問題:背(bei)景色過(guo)高是什(shen)么原因(yin)?
回答:造成背景色過高主要有以下幾點原因:
1)不正確的洗滌
洗滌不充分或省(sheng)略洗滌步驟中的任何一步均會導致背景色(se)過高。
解決(jue)方法(fa):檢(jian)查洗滌緩沖液的(de)(de)體積并確(que)(que)保完成所有的(de)(de)洗滌步驟;確(que)(que)保洗滌緩沖液的(de)(de)正確(que)(que)稀釋和正確(que)(que)使用。
2)底物污染
確保(bao)在使用前(qian),底物不被金屬離子(zi)或氧化劑污染;
在(zai)實驗時留(liu)存一些額外的(de)底物(wu)
底物本身不(bu)應該有顏色
3)稀釋液污染
我們(men)的(de)大多(duo)數稀釋(shi)液均含有蛋白,在(zai)首次(ci)開瓶(ping)時(shi)可能會造成污(wu)染。在(zai)從瓶(ping)中取(qu)液體時(shi)一定要(yao)用 “滅菌” 的(de)槍(qiang)頭
4) 底物曝光
底(di)物(wu)曝光會(hui)使底(di)物(wu)變成蘭色(se),因此在(zai)加入板(ban)內之前要保存在(zai)暗(an)處(chu)(即(ji)試劑瓶內)
5) 偶合物的(de)錯(cuo)誤(wu)稀釋
偶合物濃度(du)過高(gao)會造成高(gao)背景(jing)色,因此要嚴格(ge)按照產(chan)品說(shuo)明書稀釋
6) 錯誤的孵育時(shi)間和溫度
必須(xu)嚴格按照(zhao)產品(pin)說明(ming)書(shu)來(lai)確定孵育時間和溫(wen)度
7) 包被(bei)板保存不當
如果(guo)包被板(ban)只用了一部分(fen),一定要正確(que)保存剩余的板(ban)條。
問(wen)題(ti):測(ce)試內CV(變異(yi)系數(shu))過高是什(shen)么原因(yin)?
回答(da):造成測試內CV(變異系數)過高主要有以下幾點原(yuan)因:
1)在(zai)洗滌或吸取移液時,刮擦到板孔內部引(yin)起包被的抗體脫落
注意在洗滌包被板(ban)或吸移標準品(pin)和樣(yang)品(pin)時(shi)不(bu)要刮擦(ca)到板(ban)孔內表面。
2)在剝除包被板覆蓋物時造成孔(kong)與孔(kong)間的交(jiao)叉(cha)污染
在(zai)每次孵育完(wan)成(cheng)時,一(yi)定(ding)要(yao)小心地剝除包被板覆蓋物(wu),以免孔與孔間的交叉污染。
3)樣品不均一
確保所測試樣品(pin)是均一的,在加入包被板前要混勻
4)邊緣效應
在孵育時要(yao)封(feng)好包被(bei)板,并盡可能在100 rpm的(de)振(zhen)蕩器上(shang)孵育。
5)移液(ye)器(qi)沒(mei)有(you)正確校準
6)在實驗(yan)時,要確(que)保移液器經過(guo)正確(que)校準(zhun)
問題:標準曲線(xian)不對是什(shen)么(me)原因?
回(hui)答:造成(cheng)標準(zhun)曲線不主要有以下幾點原(yuan)因:
1)凍干標準品重懸不正確
確(que)保凍干(gan)標準品重(zhong)懸在正確(que)的液體中(zhong),并以(yi)正確(que)的體積(ji)重(zhong)懸。重(zhong)懸體積(ji)在說明書和試劑(ji)瓶(ping)的標簽上(shang)均有表明
2)重懸時間過短
確保足夠的時間(jian),以完全溶解凍(dong)干標準品
3)濃縮貯存標(biao)準品的(de)不(bu)正確稀釋
濃縮貯存標準(zhun)品要嚴格按照產品說明書正確(que)稀釋
4)貯存(cun)標準品/預稀釋(shi)液的不正(zheng)確保(bao)存(cun)
在說明書(shu)(shu)已注明貯存標準品(pin)和預(yu)稀釋液的保存條(tiao)件,一定要嚴格按照說明書(shu)(shu)操作。
5)標準品污染
使(shi)用無菌槍頭,保存方法正確可以防止標準品的污染。
6)標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)時沒(mei)有正確混勻
在系列稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品時,要保證每步稀(xi)釋(shi)時均(jun)正確混(hun)勻。
7)檢測波長不正確
要(yao)保證分(fen)光光度(du)劑的(de)檢測波長是正(zheng)確的(de)。
8)使(shi)用其它批號的(de)標準品
只能使用(yong)(yong)同一試劑盒內的標準品(pin),不可以使用(yong)(yong)其(qi)它(ta)批號/試劑盒中的標準品(pin)。
問(wen)題:不(bu)顯色是(shi)什么原因?
回(hui)答(da):造成不顯(xian)色主(zhu)要有(you)以下(xia)幾點原因(yin):
1)測試前(qian)未(wei)將試劑恢復至室(shi)溫(wen)
在實驗開始前要將所有試劑恢(hui)復至室(shi)溫。
2)某些試劑的(de)不(bu)正確保存
所(suo)有試(shi)劑的(de)保存方(fang)法在說明(ming)書中均有詳述,要嚴格依其操作。
3)HRP偶合試劑(ji)的污染
在此試(shi)劑用前一定要確保無污染(ran)。
4)HRP偶(ou)合試劑的不正(zheng)確稀釋
如果HRP偶合試劑濃縮液過(guo)度稀釋(shi),則顯(xian)色(se)變(bian)弱(ruo),要按說明書(shu)操作。
5)2組分TMB的(de)不正確(que)混合
按說(shuo)明書所示比例混合(he)TMB底物(wu),并保證正確混勻(yun)
6)省略孵育步驟
說明書中任何(he)一步孵育步驟均(jun)不可(ke)省略。
7)洗(xi)滌(di)后或儲(chu)存時,板孔干燥(zao)
洗滌后(hou)(hou),在吸水紙上拍打板(ban)條以(yi)去(qu)除多余(yu)的(de)洗滌緩沖液,之后(hou)(hou)要(yao)立即進行后(hou)(hou)面的(de)操作步(bu)驟或倒口在吸水紙上不超過15分(fen)鐘,以(yi)免板(ban)孔干燥。
8)在洗(xi)滌或吸取移液時,刮(gua)擦到(dao)板孔內部引起包被的抗(kang)體脫落(luo)
注(zhu)意在洗滌(di)包(bao)被板(ban)或吸移標準品(pin)和(he)樣(yang)品(pin)時不(bu)要刮擦到板(ban)孔內(nei)表面。
9)樣品不適(shi)合(he)此檢測
在說明書(shu)中會(hui)列出每種產品的(de)適用標(biao)本(ben)范(fan)圍,超出范(fan)圍的(de)標(biao)本(ben)可能不適于此試劑盒或者檢測條件(jian)需要摸索(如調節稀(xi)釋度等)
問題:樣(yang)品(pin)或標準品(pin) “溢值” 是什么原因?
回答(da):造(zao)成樣品(pin)或標(biao)準品(pin) “溢(yi)值” 主要有以下幾點原因:
1)樣品/標準品不(bu)正確稀釋
要嚴格(ge)按照說(shuo)明書來稀釋樣(yang)品和標準品。
2)偶合試劑(ji)不正(zheng)確(que)稀釋
要嚴格按照說(shuo)明書(shu)來稀釋偶(ou)合(he)試(shi)劑(ji)(ji),濃度過高(gao)會造成OD的(de) “溢(yi)值” HRP偶(ou)合(he)試(shi)劑(ji)(ji)的(de)不正(zheng)確稀釋
3)所用稀釋液不對
只(zhi)能使用相應試劑(ji)盒內的稀釋(shi)液稀釋(shi)樣品和標(biao)準(zhun)品。
4)檢測波長不正確
要(yao)保證(zheng)分(fen)光光度(du)劑的檢測波長是正確的。
5)TMB底物的顯色時間過長
請監(jian)控顯色(se)時(shi)間。說明書中所示的顯色(se)時(shi)間可(ke)能因為(wei)溫度和其它(ta)檢測條件的不同而稍有變化。
6)樣品不適合此(ci)檢測
在說(shuo)明書中會列出(chu)每(mei)種產品的適用(yong)標本(ben)范(fan)圍(wei),超(chao)出(chu)范(fan)圍(wei)的標本(ben)可能不適于此(ci)試劑(ji)盒或(huo)者檢測條件需要摸(mo)索(如調節稀釋度等)
7)樣品(pin)/標準品(pin)污染
樣品或標準品的污染(ran)可能會(hui)導(dao)致檢測結果 “溢值”。
8)孵育時間/溫(wen)度(du)不(bu)正確
要嚴格按照(zhao)說明書來確定孵(fu)育時間和(he)溫(wen)度。
9)在孵育時(shi)為蓋(gai)上上海邦(bang)景(jing)板覆(fu)蓋(gai)物
在(zai)孵(fu)育時(shi)需蓋(gai)上上海邦景(jing)板覆蓋(gai)物,以(yi)防(fang)止液體蒸發或孵(fu)育期間的污染。每個(ge)試劑(ji)盒內均(jun)有足(zu)夠數量的上海邦景(jing)板覆蓋(gai)物。