購買FAQ
問(wen)題(ti):如果試劑的體積很(hen)小,我(wo)該怎么辦?
回答:如果試劑的體積很小,請在使用前(qian)將試劑瓶離心,以確保試劑集中于瓶底(di)。
問(wen)題:不按(an)指定(ding)的方法保存(cun)試劑可(ke)以(yi)嗎?
回(hui)答:不推薦,否則試劑的質量無法保證。
問題:可(ke)以將(jiang)不同批號或試(shi)劑盒內的同一試(shi)劑混(hun)用嗎(ma)?
回答:不可以。
問題:在包(bao)被板使用前(qian)必(bi)須洗嗎?
回答:不是(shi)必須,但推薦使(shi)用,因(yin)為如果省略此步驟(zou)精確度可能會降低(di)。
問題:孵育時間延長或縮短可(ke)以嗎(ma)?
回答(da):孵育時間(jian)必須(xu)嚴格按照說明書(shu)操作,才能得到最佳的結果(guo)。
問題:實驗必須重(zhong)復一(yi)次嗎?
回答:不(bu)必須(xu),但對(dui)于每個(ge)樣本和(he)標準品建(jian)議做復孔。
問題:貴公司(si)的(de)ELISA試劑盒可以檢測哪些類型的(de)標本?
回答:我(wo)們的大多數ELISA試劑盒(he)均適(shi)用(yong)于人的血清,血漿,細(xi)胞培養上清液(ye)和(he)其它體液(ye)。在產品說(shuo)明書(shu)和(he)我(wo)們的目(mu)錄(lu)上您會看到具體的適(shi)用(yong)范圍。
問(wen)題:貴(gui)公司的標(biao)準與國際標(biao)準相關嗎?
回答:我公(gong)司的下列產品與國際標(biao)準(zhun)1:1相關
human IFN-γ Int. Referenz NIBSC 82/587 50pg = 1IU
human IL-2 Int. Referenz NIBSC 86/504 76pg = 1IU
human IL-5 Int. Referenz NIBSC 90/586 100pg = 1IU
human IL-6 Int. Referenz NIBSC 89/548 10pg = 1IU
human IL-10 Int. Referenz NIBSC 93/722 200pg = 1IU
human IL-12 Int. Referenz NIBSC 95/544 100pg = 1IU
human IL-13 Int. Referenz NIBSC 94/622 1ng = 1IU
human TNF-β Int. Referenz NIBSC 87/640 6.7pg = 1IU
murine IL-2 Int. Referenz NIBSC 93/566 10pg = 1IU
murine IL-4 Int. Referenz NIBSC 91/656 100pg = 1IU
murine IL-6 Int. Referenz NIBSC 93/730 10pg = 1IU
murine IL-10 Int. Referenz NIBSC 93/672 1pg = 1IU
問題:背景色過高是(shi)什么原因?
回答:造成背景(jing)色過高主要有以下(xia)幾點原因:
1)不正確的洗滌
洗滌(di)不充分或省略洗滌(di)步(bu)驟中(zhong)的任何(he)一(yi)步(bu)均會(hui)導(dao)致背景色過高。
解(jie)決方法:檢查洗(xi)滌(di)緩沖液的體(ti)積并確(que)保完成所有的洗(xi)滌(di)步驟;確(que)保洗(xi)滌(di)緩沖液的正(zheng)確(que)稀釋和正(zheng)確(que)使用。
2)底物污染
確(que)保在使用前,底物不被金(jin)屬離(li)子或氧化劑污染;
在實驗時留(liu)存一些額外的底(di)物
底物本身不應該有(you)顏(yan)色
3)稀釋液污染
我(wo)們的大(da)多數稀釋液均含有蛋白,在首次(ci)開瓶(ping)時可能會造成污(wu)染。在從瓶(ping)中取液體時一定要用 “滅菌” 的槍頭(tou)
4) 底物曝光
底(di)物曝光(guang)會(hui)使底(di)物變成蘭(lan)色,因(yin)此在(zai)加入板內(nei)(nei)之前要(yao)保存在(zai)暗處(即(ji)試劑(ji)瓶內(nei)(nei))
5) 偶合(he)物的錯(cuo)誤稀(xi)釋
偶合物濃度過高會(hui)造(zao)成(cheng)高背(bei)景色,因(yin)此要嚴格按(an)照產(chan)品說明書稀釋
6) 錯誤的孵育時間(jian)和溫度(du)
必須(xu)嚴格按照產(chan)品說明(ming)書來確定(ding)孵育時間和溫度
7) 包被(bei)板(ban)保(bao)存不當
如果包(bao)被板(ban)只用了一(yi)部分,一(yi)定要正確保存剩(sheng)余的(de)板(ban)條。
問題:測試(shi)內CV(變異系(xi)數(shu))過高(gao)是什么原因?
回(hui)答:造成測試內CV(變(bian)異系數)過高主(zhu)要有以(yi)下幾點原因:
1)在洗滌或(huo)吸取移液時,刮擦到板(ban)孔內部(bu)引起包被的抗體脫落(luo)
注意在洗滌包被(bei)板(ban)或吸移標(biao)準品和樣品時不要(yao)刮擦(ca)到板(ban)孔內(nei)表面。
2)在剝除包被板覆(fu)蓋物時造成孔與孔間的交叉污染(ran)
在每次孵育完成時,一定要小(xiao)心地剝除(chu)包被板覆蓋物,以免孔與孔間的(de)交(jiao)叉(cha)污染。
3)樣品不均一
確保所測(ce)試樣品(pin)是均一(yi)的,在加入包被板(ban)前要(yao)混勻
4)邊緣效應
在孵(fu)育時要封好包被(bei)板,并盡(jin)可能在100 rpm的振蕩(dang)器(qi)上孵(fu)育。
5)移液器沒有正確校準
6)在實驗時(shi),要確(que)(que)保移液器經過正確(que)(que)校(xiao)準(zhun)
問題:標準曲線(xian)不(bu)對是什么原(yuan)因?
回答:造成標(biao)準曲線不主要有以(yi)下幾點原因:
1)凍(dong)干標準品(pin)重懸不(bu)正(zheng)確
確保凍干標準(zhun)品重懸在(zai)正確的液體中,并(bing)以(yi)正確的體積(ji)重懸。重懸體積(ji)在(zai)說明書和(he)試(shi)劑瓶的標簽上均(jun)有表明
2)重懸時間過短
確保足夠的(de)時間,以完全溶解凍干標準(zhun)品
3)濃縮(suo)貯存標準品的不(bu)正確稀(xi)釋(shi)
濃縮貯存(cun)標準品要嚴格按(an)照產品說明書正(zheng)確(que)稀釋(shi)
4)貯存(cun)標準品/預稀釋液(ye)的不正確(que)保存(cun)
在(zai)說明書已(yi)注(zhu)明貯存標準品和預稀(xi)釋液的保存條件,一定要(yao)嚴格按照說明書操作。
5)標準品污染
使用無菌槍頭(tou),保存方法正確(que)可以防止標準(zhun)品的污染(ran)。
6)標準品(pin)稀釋時(shi)沒有正確(que)混(hun)勻(yun)
在(zai)系列稀(xi)釋(shi)標準品時,要保(bao)證每步(bu)稀(xi)釋(shi)時均正(zheng)確混勻。
7)檢測波長不正確
要保證分光光度劑的(de)檢測波長是正確的(de)。
8)使(shi)用(yong)其(qi)它批號的標準(zhun)品
只(zhi)能使(shi)用(yong)同一試劑盒(he)內(nei)的(de)標準品,不可以使(shi)用(yong)其它批號/試劑盒(he)中(zhong)的(de)標準品。
問題:不顯(xian)色是什么(me)原因?
回答:造成(cheng)不顯色主要有以下幾點(dian)原(yuan)因:
1)測(ce)試(shi)前未將試(shi)劑恢(hui)復至室溫
在(zai)實(shi)驗開始前要將所(suo)有試(shi)劑(ji)恢復至室溫。
2)某些試劑的不正確保存
所有試劑的保存(cun)方法在說(shuo)明書中(zhong)均有詳述(shu),要嚴格(ge)依其操(cao)作(zuo)。
3)HRP偶合(he)試劑的污染(ran)
在此試劑用(yong)前一定要(yao)確保無污染。
4)HRP偶合試劑(ji)的不正確稀釋
如果HRP偶合試劑(ji)濃(nong)縮(suo)液(ye)過度稀釋,則顯色變弱,要按說明(ming)書操作。
5)2組分(fen)TMB的(de)不正確混合
按說明(ming)書(shu)所示比例(li)混(hun)合TMB底(di)物,并保證正確混(hun)勻
6)省略孵育步驟
說(shuo)明書(shu)中任何一步(bu)孵育步(bu)驟均不可(ke)省(sheng)略。
7)洗滌后或儲存(cun)時,板孔干燥
洗滌后(hou),在(zai)吸水紙上拍打板條以去除(chu)多余的洗滌緩沖液,之(zhi)后(hou)要立即進行后(hou)面的操作步驟或倒(dao)口在(zai)吸水紙上不超過(guo)15分(fen)鐘,以免板孔干燥。
8)在(zai)洗滌或吸取移液時,刮(gua)擦(ca)到板孔內部引起包被(bei)的抗體(ti)脫落
注意(yi)在(zai)洗滌(di)包被板(ban)或吸移標準品和樣品時(shi)不(bu)要刮擦到板(ban)孔內表面(mian)。
9)樣品不適合此檢測
在說明書中(zhong)會列出每種產品的(de)適(shi)用(yong)標(biao)本范(fan)圍(wei),超出范(fan)圍(wei)的(de)標(biao)本可能不適(shi)于此(ci)試(shi)劑盒或者檢測條件需要摸索(如調節稀釋度等)
問題:樣品(pin)或標準品(pin) “溢值(zhi)” 是什么原因?
回答:造成樣(yang)品或標準品 “溢值” 主要有以(yi)下(xia)幾(ji)點原因:
1)樣品/標(biao)準品不正確稀(xi)釋
要嚴(yan)格按照說(shuo)明書來(lai)稀(xi)釋樣品和標準品。
2)偶合試(shi)劑不正確稀釋
要嚴格(ge)按照說明(ming)書(shu)來稀釋(shi)偶合試劑,濃度過高會造(zao)成OD的 “溢值” HRP偶合試劑的不(bu)正確(que)稀釋(shi)
3)所用稀釋液不對
只能使用相(xiang)應試劑(ji)盒內的稀釋(shi)液稀釋(shi)樣品和標準品。
4)檢測波長不正確
要保(bao)證分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度劑的檢(jian)測波長是(shi)正確的。
5)TMB底物(wu)的顯(xian)色時間過長
請監控顯(xian)色(se)時間(jian)。說明書中所示的顯(xian)色(se)時間(jian)可能因為(wei)溫度和(he)其它檢(jian)測條(tiao)件的不同而稍(shao)有變化。
6)樣(yang)品不適(shi)合此檢測(ce)
在說明書中會列出每種產品(pin)的適(shi)用(yong)標(biao)本范圍(wei),超出范圍(wei)的標(biao)本可能不適(shi)于此試劑盒(he)或(huo)者(zhe)檢測條件需要摸索(如(ru)調節稀釋度等)
7)樣品/標(biao)準品污染
樣品或(huo)標準(zhun)品的污染可能會導致檢(jian)測結果 “溢值”。
8)孵育時(shi)間/溫度不正(zheng)確
要嚴格按(an)照說明書來確定(ding)孵(fu)育(yu)時間(jian)和溫度。
9)在(zai)孵育(yu)時為蓋上(shang)上(shang)海邦景板(ban)覆蓋物
在孵育時需蓋(gai)上(shang)(shang)上(shang)(shang)海(hai)邦(bang)景板覆(fu)蓋(gai)物(wu),以防(fang)止液體蒸發(fa)或孵育期(qi)間(jian)的(de)污染。每個試劑盒內均有足(zu)夠數量的(de)上(shang)(shang)海(hai)邦(bang)景板覆(fu)蓋(gai)物(wu)。