Matrigel 基底膜基質，Matrigel基質會(hui)有色(se)差變化（淡黃(huang)色(se)到(dao)深紅色(se)），是由(you)于酚紅和碳酸(suan)氫(qing)鹽與(yu)CO2作用引起的(de)，但(dan)是與(yu)5％CO2平(ping)衡后色(se)差即會(hui)減少。凍融后，輕輕搖(yao)晃(huang)試劑瓶使Matrigel分散(san)均勻。所有操(cao)作均需在(zai)無(wu)菌環境下進(jin)行，試劑瓶瓶蓋(gai)可用70％乙醇(chun)擦拭，并自然(ran)干燥。應(ying)使用預冷的(de)移液器以保(bao)證Matrigel呈(cheng)勻漿狀(zhuang)。

Matrigel基底膜/基質(zhi)膠形成的(de)三(san)維(wei)培(pei)(pei)養基質(zhi)，可促進上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)、肝(gan)細(xi)(xi)胞(bao)、塞爾托利氏細(xi)(xi)胞(bao)、黑色素瘤細(xi)(xi)胞(bao)、血(xue)管內(nei)皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)、甲狀腺(xian)細(xi)(xi)胞(bao)及(ji)(ji)毛(mao)囊細(xi)(xi)胞(bao)等的(de)貼壁與分(fen)化。Matrigel能影響成鼠(shu)肝(gan)臟(zang)細(xi)(xi)胞(bao)和人乳腺(xian)上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)三(san)維(wei)培(pei)(pei)養物(wu)的(de)基因表(biao)達(da)。同時，Matrigel可用作多種(zhong)腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)侵襲(xi)研究的(de)基本支架(jia)，體內(nei)外血(xue)管新(xin)生研究必須(xu)的(de)基質(zhi)，以及(ji)(ji)體內(nei)動(dong)物(wu)模型移植瘤細(xi)(xi)胞(bao)生長的(de)三(san)維(wei)支架(jia)。Matrigel還能支持外周神經的(de)新(xin)生和牛輸卵管上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)分(fen)化。

操作指南：
BD采(cai)用(yong)技術，從(cong)富(fu)含(han)胞(bao)外(wai)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)EHS小(xiao)鼠腫(zhong)瘤中分(fen)(fen)離出BD Matrigel 基(ji)(ji)底膜(mo)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)，其(qi)主要成(cheng)分(fen)(fen)由層粘(zhan)連蛋(dan)(dan)白(bai)，Ⅳ型(xing)膠原，巢蛋(dan)(dan)白(bai)，硫酸肝素糖蛋(dan)(dan)白(bai)等組(zu)成(cheng)，還包含(han)生(sheng)長因子和(he)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)金屬蛋(dan)(dan)白(bai)酶等。BD Matrigel基(ji)(ji)底膜(mo)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)在室溫(wen)條件下，聚合形成(cheng)具有(you)(you)生(sheng)物(wu)學活(huo)性(xing)的(de)三維基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)，模擬體內細胞(bao)基(ji)(ji)底膜(mo)的(de)結構、組(zu)成(cheng)、物(wu)理特性(xing)和(he)功(gong)能，有(you)(you)利于體外(wai)細胞(bao)的(de)培養和(he)分(fen)(fen)化，以及對細胞(bao)形態、生(sheng)化功(gong)能、遷移(yi)、侵染和(he)基(ji)(ji)因表達(da)的(de)研究(jiu)。

BD Matrigel 基(ji)底膜(mo)基(ji)質形成的(de)(de)三維(wei)培(pei)養基(ji)質，可促進(jin)上(shang)皮(pi)細胞(bao)、肝細胞(bao)、Sertoli細胞(bao)、黑色素瘤細胞(bao)、血管(guan)(guan)(guan)內皮(pi)細胞(bao)、甲狀(zhuang)腺細胞(bao)及(ji)毛(mao)囊細胞(bao)等的(de)(de)貼(tie)壁與分化(hua)。同(tong)時(shi)，Matrigel還能影響乳腺上(shang)皮(pi)細胞(bao)的(de)(de)蛋白表達，支持外周神(shen)經的(de)(de)新生(sheng)和牛輸(shu)卵管(guan)(guan)(guan)上(shang)皮(pi)細胞(bao)的(de)(de)分化(hua)。高濃度的(de)(de)Matrigel適用(yong)于研究體內血管(guan)(guan)(guan)生(sheng)成和腫(zhong)瘤細胞(bao)遷(qian)移及(ji)腫(zhong)瘤模型的(de)(de)建(jian)立等。

細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長，也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層，可以用于細胞貼壁，但不能用于細胞的分化研究。
注意：可將凍(dong)融后的(de)Matrigel分(fen)(fen)裝在多(duo)個小(xiao)管，所有分(fen)(fen)裝均需用(yong)預(yu)冷(leng)的(de)凍(dong)存管，迅速冷(leng)凍(dong)并保存，避免(mian)多(duo)次凍(dong)融。

推薦包被與成膠方法：
注意：為了保證Matrigel基質膜的成膠性能與穩定性，稀釋濃度不應低于1：3，可用無血清培養基稀釋，Matrigel成膠后立即使用。
薄膠成膠方法：
     1.凍融后，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
     2.將需要使用的培養板置于冰上，加入濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigel基質。
     3.在37℃放置30分鐘，即可使用。
厚膠成膠方法：
     1.凍融后，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
     2.將需要使用的培養板置于冰浴，將培養的細胞與Matrigel基質混合，用移液槍頭使其懸浮于基質中。加入濃度為150－200μL/cm2生長面積的Matrigel基質。
     3.在37℃放置30分鐘，可成膠。可以加入細胞培養的基質，也可使細胞直接生長在膠表面。
薄層包被方法：
    1.凍融后，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
    2.根據使用需要，采用無血清培養基稀釋Matrigel基質。根據實驗需要確定最佳包被濃度。
    3.將稀釋的Matrigel基質包被于所需的培養器皿中，包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時。
4.去除未(wei)結合的Matrigel，用無血清培養(yang)基輕(qing)輕(qing)地沖(chong)洗。