Matrigel   基(ji)底膜基(ji)質，無(wu)酚紅，Matrigel基(ji)質會有色差變化（淡黃(huang)色到(dao)深(shen)紅色），是(shi)由(you)于酚紅和碳(tan)酸氫鹽與(yu)CO2作用(yong)(yong)引(yin)起(qi)的，但是(shi)與(yu)5％CO2平衡(heng)后色差即會減少。凍融后，輕(qing)輕(qing)搖晃試劑(ji)瓶使Matrigel分散均勻(yun)。所有操作均需在無菌環境下進(jin)行，試劑(ji)瓶瓶蓋可用(yong)(yong)70％乙(yi)醇(chun)擦拭，并自(zi)然干燥。應使用(yong)(yong)預冷的移液器以(yi)保(bao)證Matrigel呈勻(yun)漿狀。

Matrigel, Reduced Growth Factor（Matrigel RGF）是(shi)低生長因(yin)子的基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)膠，基(ji)(ji)于(yu)(yu)標準(zhun)級別(bie)的基(ji)(ji)底膜/基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)膠進一(yi)步純(chun)化以去除其內所含的生長因(yin)子水平，包括(kuo)EGF、IGF、FGF、TGF-β 等(deng)，其中TGF-β 由(you)于(yu)(yu)偶聯在(zai)膠原(yuan)酶IV上和/或(huo)在(zai)純(chun)化過程中與膠內的主要成(cheng)分(fen)聚集在(zai)一(yi)起，濃(nong)度降低的相對(dui)比較少。本基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)膠（低生長因(yin)子）適(shi)用于(yu)(yu)更廣的細(xi)胞(bao)培(pei)養研究(jiu)，包括(kuo)2D/3D培(pei)養、血管生成(cheng)、腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)遷移(yi)和細(xi)胞(bao)侵襲(xi)、體(ti)內腫(zhong)瘤模型建(jian)立(li)等(deng)。特(te)別(bie)適(shi)用于(yu)(yu)對(dui)基(ji)(ji)質(zhi)(zhi)成(cheng)分(fen)更為嚴格的實驗，如(ru)信號轉導相關研究(jiu)、闡釋生長因(yin)子功(gong)能的研究(jiu)或(huo)者基(ji)(ji)因(yin)表達研究(jiu)等(deng)。本品為無菌(jun)制品，濃(nong)度為9-20mg/ml。
儲存條件：-20℃，有效期六個月。

 

操作指南：

BD采用技術，從富含(han)胞外(wai)基(ji)質(zhi)蛋白(bai)的(de)(de)EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基(ji)底膜(mo)基(ji)質(zhi)，其主要成分由層粘連蛋白(bai)，Ⅳ型膠原，巢蛋白(bai)，硫酸肝(gan)素(su)糖蛋白(bai)等組成，還(huan)包含(han)生長因子和(he)基(ji)質(zhi)金屬蛋白(bai)酶(mei)等。BD Matrigel基(ji)底膜(mo)基(ji)質(zhi)在室溫條件下，聚(ju)合形(xing)(xing)成具有(you)生物學(xue)活性的(de)(de)三維基(ji)質(zhi)，模(mo)擬體內細(xi)(xi)胞基(ji)底膜(mo)的(de)(de)結(jie)構、組成、物理特性和(he)功能，有(you)利(li)于體外(wai)細(xi)(xi)胞的(de)(de)培養和(he)分化(hua)(hua)，以(yi)及(ji)對(dui)細(xi)(xi)胞形(xing)(xing)態、生化(hua)(hua)功能、遷(qian)移、侵染和(he)基(ji)因表達的(de)(de)研究。

 

BD Matrigel 基底膜基質形成的(de)三維培養基質，可促進(jin)上(shang)皮(pi)(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、肝細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、Sertoli細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、黑色素瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、血(xue)管(guan)內皮(pi)(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、甲狀(zhuang)腺細(xi)(xi)胞(bao)(bao)及(ji)毛囊細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等的(de)貼壁與分化。同時，Matrigel還能(neng)影響乳腺上(shang)皮(pi)(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)蛋白表達，支持外(wai)周(zhou)神經的(de)新(xin)生和牛輸卵管(guan)上(shang)皮(pi)(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)分化。高(gao)濃度的(de)Matrigel適用于研究體內血(xue)管(guan)生成和腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)遷移及(ji)腫瘤模型的(de)建立等。

 

細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長，也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層，可以用于細胞貼壁，但不能用于細胞的分化研究。

注意：可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管，所有分裝均需用預冷的凍存管，迅速冷凍并保存，避免多次凍融。

推薦包被與成膠方法：

注意：為了保證Matrigel基質膜的成膠性能與穩定性，稀釋濃度不應低于1：3，可用無血清培養基稀釋，Matrigel成膠后立即使用。

薄膠成膠方法：

     1.凍融(rong)后，用(yong)預冷的移液(ye)槍頭混勻Matrigel基(ji)質成勻漿狀。

     2.將需要使用的培養(yang)板置于冰(bing)上，加入(ru)濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigel基質(zhi)。

     3.在37℃放置(zhi)30分鐘，即可使(shi)用(yong)。

厚膠成膠方法：

     1.凍(dong)融后，用預冷的移液槍頭混勻(yun)Matrigel基(ji)質成勻(yun)漿狀。

     2.將需(xu)要(yao)使用的培養板置于冰浴(yu)，將培養的細胞與Matrigel基(ji)質(zhi)混合，用移(yi)液(ye)槍頭(tou)使其懸浮于基(ji)質(zhi)中。加入濃度為150－200μL/cm2生(sheng)長面積(ji)的Matrigel基(ji)質(zhi)。

     3.在37℃放置30分鐘(zhong)，可(ke)成膠。可(ke)以加入細胞(bao)培養的基(ji)質，也可(ke)使(shi)細胞(bao)直接生(sheng)長在膠表面。

薄層包被方法：

    1.凍(dong)融后，用預(yu)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。

    2.根據使用需要，采用無血清培養基(ji)稀釋Matrigel基(ji)質(zhi)。根據實驗需要確定最佳包被(bei)濃度。

    3.將稀釋的Matrigel基質包(bao)被于所需的培養(yang)器皿(min)中，包(bao)被量至(zhi)少覆(fu)蓋整個器皿(min)的生長(chang)表面(mian)。室溫下孵育1小(xiao)時。

4.去除未(wei)結合的Matrigel，用無血(xue)清培養基輕輕地沖洗。