特點優勢：

1.  特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對xi 菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到佳 。

    2.   重(zhong)現性(xing)：該系列所有產品均經過大量實驗(yan)菌株的驗(yan)證，重(zhong)現性(xing)為佳 。

    3.   靈敏性：該系列(lie)產(chan)品(pin)可(ke)實現對(dui)檢測菌(jun)的高靈敏檢測，當樣品(pin)中xi 菌(jun)的濃(nong)度達到103cfu/ml時(shi)，可(ke)實現對(dui)其的直接(jie)檢測，無需繁(fan)瑣的增(zeng)菌(jun)過程。

    4.   實用性：檢(jian)測范圍廣，涵蓋了(le)對人體危(wei)害較為嚴重的17種呼(hu)吸(xi)道及腸(chang)道致病(bing)菌，可(ke)實現對臨床(chuang)樣品及其他環境取樣的快速(su)檢(jian)測，整個檢(jian)測過程為3-4個小時。

    5.   優(you)勢(shi)1：序(xu)(xu)列資源豐富，除(chu)GenBank公(gong)布的(de)(de)序(xu)(xu)列外，公(gong)司還進行了大量菌(jun)株(zhu)的(de)(de)序(xu)(xu)列破(po)譯，從理(li)論上保證所選引物具有良好的(de)(de)保守性和特異性。

    6.   優(you)勢2：該(gai)系列試劑盒(he)(he)均經過(guo)大量的(de)(de)保(bao)(bao)守性(xing)及(ji)特(te)異(yi)性(xing)實驗驗證，憑借公(gong)司擁有的(de)(de)豐(feng)富的(de)(de)菌種資源，每一種檢測試劑盒(he)(he)均經過(guo)了20余(yu)種標準菌株和臨(lin)床菌株的(de)(de)保(bao)(bao)守性(xing)驗證及(ji)40余(yu)種近緣(yuan)標準菌株和臨(lin)床菌株的(de)(de)特(te)異(yi)性(xing)驗證，確保(bao)(bao)在使用(yong)過(guo)程中不會出(chu)現任何的(de)(de)假陽性(xing)及(ji)假陰性(xing)報告(gao)結(jie)果。

RNA和(he)DNA提(ti)取：

裂解：裂解公式可能因您要提取 DNA 還是 RNA 而異，但共同點是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。

Chaotropes（離(li)液劑）的作(zuo)用(yong)：Chaotrope會破壞氫鍵(jian)及疏水間的相互作(zuo)用(yong)。離(li)液鹽包括(kuo)鹽酸(suan)胍、硫qing酸(suan)胍、尿素和高lv酸(suan)鋰(li)。

洗滌劑：除了離液劑外，裂解緩沖液中通常還有一些去污劑，以幫助蛋白質溶解和裂解。

溶jun酶和蛋白酶K:根據樣品類型，也可以使用酶進行裂解。

提取步驟：

1.從(cong)負八十冰箱取出樣(yang)品，放置于冰上緩慢解凍； （提前預冷離心機至4度(du)）

2.待(dai)解凍后（紅色），加(jia)入(ru)(ru)200 μl氯(lv)仿（加(jia)入(ru)(ru)lv仿體積(ji)為(wei)Trizol體積(ji)的1/5），劇烈震蕩（乳白紅色），冰上靜置10 min。 （氯(lv)仿為(wei)有(you)(you)(you)機(ji)(ji)溶劑，有(you)(you)(you)效的使有(you)(you)(you)機(ji)(ji)相(xiang)(xiang)和(he)無機(ji)(ji)相(xiang)(xiang)迅速分離(li)(li)。有(you)(you)(you)機(ji)(ji)相(xiang)(xiang)中主要是酚和(he)蛋白結合，從而使得蛋白和(he)RNA脫離(li)(li)，RNA進入(ru)(ru)水相(xiang)(xiang)。）

3.放(fang)置(zhi)于預冷離(li)心機，離(li)心（4度(du)，12000 rpm，15 min），離(li)心后可見(jian)明(ming)(ming)顯(xian)分三層(ceng)（上(shang)層(ceng)無色(se)透(tou)明(ming)(ming)水相為(wei)RNA層(ceng)，中(zhong)間很薄的乳白色(se)為(wei)DNA層(ceng)，下層(ceng)為(wei)紅(hong)色(se)為(wei)蛋白層(ceng)）。

4.小心緩慢吸(xi)(xi)取(qu)上清(qing)，約400 μl（寧可少吸(xi)(xi)，也不要(yao)多吸(xi)(xi)取(qu)），置于另一個新的(de)(de)1.5 ml RNase-free EP管中，加入等(deng)體積的(de)(de)異丙醇(chun)，上下顛倒混勻(yun)，常(chang)溫靜(jing)置放置15 min。

5.離心（4度，12000 rpm，15 min），可見白(bai)色沉淀（有時細胞較少看不到沉淀，可放(fang)置負二十或負八十兩小時再繼續后面(mian)步驟）

6.棄上清，每管加入950 ul 75% 乙(yi)醇，上下(xia)顛倒(dao)混勻（切記不要用槍吹打混勻，這樣會造成RNA溶解）。

7.離(li)心（4度，12000 rpm，10 min），可見底部明(ming)顯白色沉淀。

8.離心后，棄掉上清，放入(ru)離心機再次瞬離，用(yong)10 μl 的移液(ye)器洗去殘留液(ye)體， 開蓋晾干（約5 min）。

9.每個樣品根據(ju)沉淀(dian)大小加(jia)入適(shi)量DEPC水（一(yi)般20~30 μl，有時看(kan)不到沉淀(dian)，可加(jia)10 μl DEPC水溶(rong)解），吹打(da)溶(rong)解RNA，十一(yi)樓酶標儀(yi)測濃度(du)，OD值（260/280=1.8-2.0）標記，負八(ba)十保(bao)存。

備注：對于中性粒細胞提取RNA建議細胞數目大于2x106/樣品；

備注：操作過程中佩戴口罩。

PCR反應五要(yao)素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

設計引物(wu)應遵循以下(xia)原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度(du)： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的(de)片(pian)段(duan)。
③引物堿基：G+C含(han)量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不(bu)佳，G+C過多易出現非特異條帶(dai)。ATGC好隨機分(fen)布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸(suan)的成串排列。
④避(bi)免引物(wu)內(nei)部出(chu)現二(er)級結構，避(bi)免兩(liang)條引物(wu)間互補(bu)，特別(bie)是3’端的互補(bu)，否則會形(xing)成引物(wu)二(er)聚體，產生非特異(yi)的擴增(zeng)條帶(dai)。
⑤引物3’端(duan)的堿基，特(te)別是(shi) 末及倒數 個堿基，應(ying)嚴格(ge)要(yao)求配對(dui)，以(yi)避免因末端(duan)堿基不(bu)配對(dui)而導(dao)致PCR失敗。
⑥引物(wu)中有(you)或能加上(shang)合適的(de)酶切(qie)(qie)位點(dian)，被擴增的(de)靶序列 有(you)適宜(yi)的(de)酶切(qie)(qie)位點(dian)，這對酶切(qie)(qie)分析或分子克隆很(hen)有(you)好處。
⑦引物(wu)的特異(yi)性(xing)：引物(wu)應與核酸序(xu)列(lie)數據庫(ku)的其它序(xu)列(lie)無明顯同源性(xing)。

注意事項: 

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

2.各步加樣均(jun)應使(shi)用加樣器(qi)，并經常校(xiao)對(dui)其(qi)準確性，以避免(mian)試(shi)驗誤差。一次加樣時間控制在(zai)5分鐘(zhong)內，如標(biao)本數量多，推薦使(shi)用排槍(qiang)加樣。

3.請(qing)每次測定的同時做(zuo)標準曲線，做(zuo)復孔。如標本中待測物質含量過(guo)高(gao)（樣(yang)本OD值(zhi)大(da)于(yu)標準品(pin)孔di一孔的OD值(zhi)），請(qing)先用樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)一定倍(bei)數（n倍(bei)）后再測定，計算時請(qing)再乘以總稀(xi)釋(shi)倍(bei)數（×n×5）。

4.封(feng)板膜(mo)只(zhi)限一(yi)次性(xing)使(shi)用，以(yi)避免(mian)交(jiao)叉污(wu)染。

5.底物請(qing)避(bi)光保存(cun)。

6.嚴格按照說明書的操(cao)作進行，試驗結果判(pan)定必須以(yi)酶標(biao)儀(yi)讀數(shu)為準.

7.所有樣品，洗滌液(ye)和各種廢(fei)棄物都應按傳染物處理。

8.本(ben)試劑不同批號組分(fen)不得(de)混用。

9.不能使用(yong)過期產品。

10. 如與英(ying)文說(shuo)明書有異，以(yi)英(ying)文說(shuo)明書為準(zhun)。