特點優勢：

1.  特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對xi 菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到佳 。

 ;   2.   重(zhong)現(xian)性(xing)：該系列所(suo)有產品均(jun)經過大(da)量實驗菌株的驗證(zheng)，重(zhong)現(xian)性(xing)為佳 。

    3.   靈敏(min)性：該系(xi)列產品可實現對檢測(ce)菌(jun)的高靈敏(min)檢測(ce)，當樣品中xi 菌(jun)的濃度達到103cfu/ml時(shi)，可實現對其的直接檢測(ce)，無需繁瑣的增菌(jun)過程。

    4.   實用性(xing)：檢(jian)測(ce)范(fan)圍廣，涵蓋了(le)對(dui)人體危(wei)害(hai)較(jiao)為嚴(yan)重的(de)17種呼吸道(dao)(dao)及(ji)腸道(dao)(dao)致病(bing)菌，可(ke)實現對(dui)臨床(chuang)樣品及(ji)其他環境取樣的(de)快(kuai)速檢(jian)測(ce)，整個檢(jian)測(ce)過程為3-4個小時。

    5.   優(you)勢1：序列資(zi)源豐富(fu)，除GenBank公布的(de)序列外，公司還進行了大量(liang)菌(jun)株(zhu)的(de)序列破譯，從理論上保(bao)證所選引物具有良好的(de)保(bao)守性(xing)和特異(yi)性(xing)。

    6.   優勢(shi)2：該系列試劑盒(he)均經過大量的(de)(de)保守性(xing)(xing)及特異(yi)(yi)性(xing)(xing)實驗(yan)(yan)驗(yan)(yan)證(zheng)，憑借公司擁有的(de)(de)豐富的(de)(de)菌(jun)(jun)種(zhong)資源(yuan)，每一(yi)種(zhong)檢測試劑盒(he)均經過了20余(yu)種(zhong)標(biao)準菌(jun)(jun)株(zhu)和臨床菌(jun)(jun)株(zhu)的(de)(de)保守性(xing)(xing)驗(yan)(yan)證(zheng)及40余(yu)種(zhong)近緣標(biao)準菌(jun)(jun)株(zhu)和臨床菌(jun)(jun)株(zhu)的(de)(de)特異(yi)(yi)性(xing)(xing)驗(yan)(yan)證(zheng)，確(que)保在使(shi)用過程中不會出現(xian)任何的(de)(de)假(jia)陽性(xing)(xing)及假(jia)陰(yin)性(xing)(xing)報告(gao)結(jie)果(guo)。

RNA和DNA提取：

裂解：裂解公式可能因您要提取 DNA 還是 RNA 而異，但共同點是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。

Chaotropes（離液劑(ji)）的(de)作用(yong)：Chaotrope會破壞氫(qing)鍵及疏水(shui)間的(de)相互(hu)作用(yong)。離液鹽包括鹽酸(suan)胍、硫qing酸(suan)胍、尿(niao)素和高lv酸(suan)鋰。

洗滌劑：除了離液劑外，裂解緩沖液中通常還有一些去污劑，以幫助蛋白質溶解和裂解。

溶jun酶和蛋白酶K:根據樣品類型，也可以使用酶進行裂解。

提取步驟：

1.從負(fu)八(ba)十(shi)冰箱取出樣(yang)品，放置于冰上(shang)緩(huan)慢解凍； （提前(qian)預冷離心(xin)機(ji)至4度）

2.待(dai)解凍后（紅色），加(jia)入200 μl氯(lv)仿（加(jia)入lv仿體積為(wei)Trizol體積的1/5），劇烈(lie)震(zhen)蕩（乳(ru)白紅色），冰上靜(jing)置(zhi)10 min。 （氯(lv)仿為(wei)有機(ji)溶劑，有效的使有機(ji)相(xiang)和(he)(he)無機(ji)相(xiang)迅速(su)分離(li)。有機(ji)相(xiang)中主(zhu)要是酚和(he)(he)蛋(dan)白結合(he)，從而使得蛋(dan)白和(he)(he)RNA脫離(li)，RNA進入水相(xiang)。）

3.放置于(yu)預冷離心機，離心（4度(du)，12000 rpm，15 min），離心后(hou)可見明顯分三層(ceng)（上(shang)層(ceng)無色(se)透(tou)明水相為(wei)(wei)RNA層(ceng)，中間(jian)很薄的乳白色(se)為(wei)(wei)DNA層(ceng)，下層(ceng)為(wei)(wei)紅色(se)為(wei)(wei)蛋白層(ceng)）。

4.小心緩慢吸(xi)取(qu)上(shang)清，約400 μl（寧可少(shao)吸(xi)，也不(bu)要多吸(xi)取(qu)），置(zhi)(zhi)于另一個新的(de)1.5 ml RNase-free EP管(guan)中，加入等體積的(de)異丙醇，上(shang)下顛倒混(hun)勻，常溫靜(jing)置(zhi)(zhi)放置(zhi)(zhi)15 min。

5.離心（4度，12000 rpm，15 min），可見白(bai)色沉(chen)淀(dian)（有時(shi)細胞較(jiao)少看不到沉(chen)淀(dian)，可放置負二(er)十(shi)或(huo)負八十(shi)兩小時(shi)再繼續后面步驟）

6.棄上清，每管加入950 ul 75% 乙醇，上下(xia)顛(dian)倒(dao)混勻(yun)（切記不要用槍吹打混勻(yun)，這樣(yang)會造成RNA溶解(jie)）。

7.離心(xin)（4度，12000 rpm，10 min），可見底部明顯(xian)白色沉淀。

8.離心(xin)后，棄掉上清，放入離心(xin)機再次瞬離，用10 μl 的移(yi)液器洗去殘留液體(ti)， 開蓋晾干（約5 min）。

9.每個樣品根據沉淀(dian)大(da)小加入適量DEPC水（一(yi)般20~30 μl，有(you)時看不(bu)到沉淀(dian)，可加10 μl DEPC水溶解），吹(chui)打溶解RNA，十一(yi)樓酶標儀測濃度，OD值（260/280=1.8-2.0）標記，負八十保存。

備注：對于中性粒細胞提取RNA建議細胞數目大于2x106/樣品；

備注：操作過程中佩戴口罩。

PCR反應五要(yao)素(su)：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

設計引物應(ying)遵(zun)循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常(chang)用為20bp左右。
②引物(wu)擴(kuo)增(zeng)跨度： 以200-500bp為宜(yi)，特(te)定條件下可擴(kuo)增(zeng)長(chang)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含(han)量(liang)以(yi)40-60%為宜，G+C太少擴(kuo)增效(xiao)果不佳，G+C過(guo)多(duo)易出(chu)現非特(te)異條(tiao)帶。ATGC好隨機分布，避(bi)免5個以(yi)上的嘌呤或嘧啶(ding)核(he)苷酸的成串(chuan)排(pai)列。
④避免引物(wu)內部出現二級結(jie)構，避免兩條引物(wu)間互補，特(te)別是3’端的互補，否則(ze)會形成引物(wu)二聚體(ti)，產生非特(te)異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿(jian)基，特(te)別是(shi) 末及(ji)倒數 個堿(jian)基，應(ying)嚴格要求配對，以避免因末端堿(jian)基不配對而導致PCR失(shi)敗。
⑥引物中有或能(neng)加上合適(shi)的酶切位點，被擴(kuo)增的靶序(xu)列 有適(shi)宜的酶切位點，這對(dui)酶切分析(xi)或分子(zi)克隆(long)很有好處(chu)。
⑦引物的(de)特(te)異性：引物應與核酸序列數據庫的(de)其它序列無明(ming)顯同源性。

注意事項: 

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

2.各步(bu)加(jia)樣均應使(shi)用加(jia)樣器，并經常(chang)校對(dui)其(qi)準確性，以避免試驗誤差。一次加(jia)樣時間控制(zhi)在(zai)5分鐘內，如標本數量多，推(tui)薦(jian)使(shi)用排(pai)槍(qiang)加(jia)樣。

3.請(qing)每次(ci)測定的同時(shi)做標準(zhun)曲線(xian)，做復孔(kong)。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準(zhun)品(pin)(pin)孔(kong)di一孔(kong)的OD值），請(qing)先(xian)用(yong)樣品(pin)(pin)稀釋液稀釋一定倍數(shu)（n倍）后(hou)再測定，計算時(shi)請(qing)再乘以總稀釋倍數(shu)（×n×5）。

4.封板膜只限一次性使用，以(yi)避免交叉(cha)污染。

5.底(di)物請避光(guang)保存。

6.嚴格按照(zhao)說(shuo)明書的(de)操作進行，試驗結(jie)果判定必須以酶標儀(yi)讀數為準(zhun).

7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物(wu)都應(ying)按傳染物(wu)處(chu)理。

8.本試劑不同(tong)批號(hao)組分不得混用。

9.不能使(shi)用過期產品。

10. 如與(yu)英(ying)文說明書有(you)異(yi)，以英(ying)文說明書為準(zhun)。