特點優勢：

1.  特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對xi 菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到佳 。

    2.   重現性：該系列所有(you)產品均經(jing)過大(da)量實驗(yan)菌株的驗(yan)證，重現性為(wei)佳 。

    3.   靈敏性：該系列產(chan)品可(ke)實(shi)(shi)現(xian)對(dui)(dui)檢測(ce)菌的高靈敏檢測(ce)，當樣品中xi 菌的濃度達到103cfu/ml時，可(ke)實(shi)(shi)現(xian)對(dui)(dui)其的直(zhi)接檢測(ce)，無(wu)需繁瑣的增菌過程。

  ;  4.   實用性(xing)：檢測(ce)范圍廣(guang)，涵蓋了對人體危害較為嚴重的(de)17種呼吸道及(ji)腸道致(zhi)病菌，可(ke)實現(xian)對臨床(chuang)樣(yang)品及(ji)其他環境取(qu)樣(yang)的(de)快速檢測(ce)，整個檢測(ce)過程(cheng)為3-4個小時。

    5.   優勢1：序(xu)列(lie)資(zi)源豐(feng)富，除GenBank公(gong)布的(de)序(xu)列(lie)外，公(gong)司(si)還進行了大量菌株的(de)序(xu)列(lie)破(po)譯，從理論(lun)上保證所選引物具有良好的(de)保守(shou)性和特異性。

    6.   優(you)勢2：該(gai)系列試(shi)劑盒(he)均經(jing)過(guo)大量的(de)保(bao)守(shou)性(xing)(xing)及特異(yi)性(xing)(xing)實驗(yan)驗(yan)證，憑(ping)借公司(si)擁有(you)的(de)豐富的(de)菌(jun)種(zhong)資(zi)源，每一種(zhong)檢測(ce)試(shi)劑盒(he)均經(jing)過(guo)了20余種(zhong)標準(zhun)菌(jun)株和(he)臨(lin)床菌(jun)株的(de)保(bao)守(shou)性(xing)(xing)驗(yan)證及40余種(zhong)近緣標準(zhun)菌(jun)株和(he)臨(lin)床菌(jun)株的(de)特異(yi)性(xing)(xing)驗(yan)證，確(que)保(bao)在使(shi)用過(guo)程中不會出現(xian)任(ren)何(he)的(de)假陽(yang)性(xing)(xing)及假陰(yin)性(xing)(xing)報告結果。

RNA和DNA提(ti)取：

裂解：裂解公式可能因您要提取 DNA 還是 RNA 而異，但共同點是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。

Chaotropes（離液劑）的作用(yong)：Chaotrope會破壞氫鍵及(ji)疏水間的相互作用(yong)。離液鹽包(bao)括鹽酸(suan)胍(gua)、硫qing酸(suan)胍(gua)、尿(niao)素(su)和高lv酸(suan)鋰。

洗滌劑：除了離液劑外，裂解緩沖液中通常還有一些去污劑，以幫助蛋白質溶解和裂解。

溶jun酶和蛋白酶K:根據樣品類型，也可以使用酶進行裂解。

提取步驟：

1.從負八十冰(bing)箱(xiang)取出樣(yang)品，放置于冰(bing)上(shang)緩慢(man)解凍(dong)； （提前預冷(leng)離心機至4度）

2.待解(jie)凍后（紅(hong)色），加入(ru)200 μl氯(lv)仿(fang)（加入(ru)lv仿(fang)體積(ji)為Trizol體積(ji)的1/5），劇(ju)烈震蕩（乳白(bai)紅(hong)色），冰上(shang)靜置(zhi)10 min。 （氯(lv)仿(fang)為有(you)機(ji)(ji)溶劑(ji)，有(you)效(xiao)的使有(you)機(ji)(ji)相(xiang)和(he)(he)無機(ji)(ji)相(xiang)迅速分離(li)。有(you)機(ji)(ji)相(xiang)中(zhong)主要是(shi)酚(fen)和(he)(he)蛋白(bai)結合，從而使得蛋白(bai)和(he)(he)RNA脫離(li)，RNA進入(ru)水(shui)相(xiang)。）

3.放(fang)置于預冷離(li)心機，離(li)心（4度，12000 rpm，15 min），離(li)心后(hou)可(ke)見明顯(xian)分三層(ceng)（上層(ceng)無(wu)色透明水相(xiang)為RNA層(ceng)，中(zhong)間(jian)很薄的(de)乳白色為DNA層(ceng)，下(xia)層(ceng)為紅色為蛋白層(ceng)）。

4.小心緩慢吸取(qu)上清，約(yue)400 μl（寧可少吸，也不(bu)要多吸取(qu)），置(zhi)(zhi)于另一個新的1.5 ml RNase-free EP管中，加(jia)入等體積的異丙醇，上下(xia)顛倒混(hun)勻，常(chang)溫靜置(zhi)(zhi)放置(zhi)(zhi)15 min。

5.離(li)心(xin)（4度，12000 rpm，15 min），可(ke)見白色(se)沉淀(dian)（有時(shi)細胞較(jiao)少看不到(dao)沉淀(dian)，可(ke)放置負二十或負八十兩小(xiao)時(shi)再繼續后面步驟(zou)）

6.棄(qi)上清，每管加入950 ul 75% 乙(yi)醇，上下顛倒混勻(yun)（切(qie)記不(bu)要用槍吹打混勻(yun)，這樣會造成RNA溶解(jie)）。

7.離心（4度，12000 rpm，10 min），可見底部明顯(xian)白色沉(chen)淀。

8.離心(xin)(xin)后(hou)，棄掉上清，放(fang)入(ru)離心(xin)(xin)機再次瞬離，用10 μl 的移液(ye)器洗去殘(can)留液(ye)體， 開蓋(gai)晾干（約(yue)5 min）。

9.每個樣品根(gen)據沉淀(dian)大小(xiao)加入適量DEPC水(shui)(shui)（一(yi)般(ban)20~30 μl，有時看不到沉淀(dian)，可加10 μl DEPC水(shui)(shui)溶(rong)解），吹打溶(rong)解RNA，十一(yi)樓酶(mei)標儀測濃度，OD值（260/280=1.8-2.0）標記(ji)，負八(ba)十保(bao)存。

備注：對于中性粒細胞提取RNA建議細胞數目大于2x106/樣品；

備注：操作過程中佩戴口罩。

PCR反(fan)應(ying)五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

設計引物應(ying)遵(zun)循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常(chang)用(yong)為20bp左右。
②引物(wu)擴(kuo)增跨度(du)： 以200-500bp為宜(yi)，特定條件(jian)下(xia)可擴(kuo)增長至(zhi)10kb的(de)片段(duan)。
③引(yin)物(wu)堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太(tai)少擴增效(xiao)果不(bu)佳，G+C過多易(yi)出現非特(te)異條(tiao)帶(dai)。ATGC好隨(sui)機分布(bu)，避免(mian)5個(ge)以上的嘌(piao)呤或嘧啶核苷酸的成串排列(lie)。
④避免引(yin)(yin)物(wu)內部(bu)出現二級結構，避免兩條引(yin)(yin)物(wu)間互補，特別是3’端(duan)的互補，否(fou)則會形成(cheng)引(yin)(yin)物(wu)二聚體，產生非特異的擴(kuo)增條帶。
⑤引物3’端(duan)的堿基，特別是 末及(ji)倒數 個堿基，應嚴格要求配(pei)對(dui)，以(yi)避免(mian)因末端(duan)堿基不配(pei)對(dui)而導致PCR失敗。
⑥引物中有(you)或能加上(shang)合適的(de)(de)酶(mei)(mei)切位(wei)點，被擴(kuo)增的(de)(de)靶序列(lie) 有(you)適宜的(de)(de)酶(mei)(mei)切位(wei)點，這(zhe)對酶(mei)(mei)切分析或分子克隆(long)很有(you)好處。
⑦引(yin)物的(de)特異性(xing)：引(yin)物應與核酸序列數據庫(ku)的(de)其它序列無(wu)明顯同源性(xing)。

注意事項: 

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

2.各步加(jia)樣(yang)(yang)均應使用(yong)加(jia)樣(yang)(yang)器，并經常校對其準確性，以避免試(shi)驗誤差。一次(ci)加(jia)樣(yang)(yang)時間控(kong)制(zhi)在5分鐘內，如標本數(shu)量多，推薦(jian)使用(yong)排槍加(jia)樣(yang)(yang)。

3.請(qing)每(mei)次(ci)測定(ding)的(de)同時(shi)做標準曲線，做復孔。如標本中(zhong)待測物質(zhi)含(han)量過(guo)高(gao)（樣本OD值大于(yu)標準品孔di一孔的(de)OD值），請(qing)先用樣品稀釋(shi)液稀釋(shi)一定(ding)倍(bei)數（n倍(bei)）后(hou)再測定(ding)，計算(suan)時(shi)請(qing)再乘以總稀釋(shi)倍(bei)數（×n×5）。

4.封板膜只限(xian)一次(ci)性使(shi)用，以避免交叉(cha)污染。

5.底物請避(bi)光保存。

6.嚴格按照說明(ming)書的操作進行(xing)，試驗結(jie)果判定必須以(yi)酶標(biao)儀讀數為(wei)準.

7.所有樣品，洗滌液(ye)和(he)各種廢棄物都應按傳染物處理(li)。

8.本試劑(ji)不同(tong)批號組分不得混用。

9.不(bu)能使用過期產品。

10. 如與英文(wen)說明書有(you)異，以英文(wen)說明書為準。