商品描述:
商品屬性
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產品名稱
DH5α(含PESC-HIS質粒)大腸桿菌
英文名稱
Escherichia coli DH5α(PESC-HIS)
規格
凍(dong)干粉
貨號
BJ-J1085
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)(rong)解(jie): 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶(rong)(rong)解(jie)質(zhi)粒(li)(li),室溫(wen)靜(jing)置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)(pei)養(yang): 將適(shi)當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布(bu)在相(xiang)應抗(kang)性(xing)的(de) LB 平(ping)板上,正(zheng)置平(ping)皿 30min(瓊脂(zhi)面務必(bi)干燥后), 倒置培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆菌落至相(xiang)應抗(kang)性(xing) LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需(xu)要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青(qing)霉(mei)素,37℃(克隆菌株DH5α,6706bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
0
應用領域
科研
共享方(fang)式
公益性共享
