商品描述:
商品屬性
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產品名稱
DH5α(含PESC-LEU質粒)大腸桿菌
英文名稱
Escherichia coli DH5α(PESC-LEU)
規格
凍干粉
貨號
BJ-J1086
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后,請(qing)加入 20μl 無菌(jun)(jun)(jun)水至(zhi)管(guan)(guan)底(di),溶解質(zhi)粒(li),室(shi)溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受(shou)態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導(dao)入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修復培養(yang): 毎管(guan)(guan)加 800µl LB 液體培養(yang)基(ji),37 ℃培養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang): 將適當體積(100 µl)的復蘇細(xi)胞(bao),涂布在相(xiang)應(ying)抗性的 LB 平板上,正(zheng)置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)(zhi)培養(yang) 12-16h,出(chu)現菌(jun)(jun)(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑(tiao)取(qu)單(dan)克隆(long)菌(jun)(jun)(jun)落至(zhi)相(xiang)應(ying)抗性 LB 液體培養(yang)基(ji)中,震蕩培養(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)粒(li)。
生(sheng)長條件(jian)
LB +氨芐青霉(mei)素,37℃(克隆菌株DH5α,7758bp)
存儲條件
2-8℃
安(an)全(quan)等級
0
應(ying)用領域
科研
共享方式
公益性共享
