商品描述:
商品屬性
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產品名稱
L4440
英文名稱
L4440載體
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1171
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)粒(li)干(gan)(gan)粉后,請加(jia)(jia)入 20μl 無菌水至(zhi)管底,溶解(jie)質(zhi)粒(li),室(shi)溫(wen)靜置 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態(tai)細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放置 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang): 毎(mei)管加(jia)(jia) 800µl LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體積(ji)(100 µl)的復蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗性(xing)的 LB 平(ping)(ping)板(ban)上,正置平(ping)(ping)皿 30min(瓊脂面務(wu)必干(gan)(gan)燥后), 倒置培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至(zhi)相(xiang)應抗性(xing) LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基中(zhong),震蕩(dang)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據(ju)試驗(yan)需要提(ti)取(qu)質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件
LB +氨芐(xia)青(qing)霉素(su),37℃(克隆(long)菌株DH5α,2790bp)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
科研
共享(xiang)方式
公益性共享(xiang)
