商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK
英文名稱
pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1192
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方(fang)法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解質(zhi)粒,室溫靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附(fu)質(zhi)粒): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液體(ti)培養(yang)基(ji),37 ℃培養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang): 將適(shi)當體(ti)積(ji)(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞(bao),涂布在(zai)相應抗性(xing)的(de) LB 平板(ban)上(shang),正(zheng)置(zhi)(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)培養(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至(zhi)相應抗性(xing) LB 液體(ti)培養(yang)基(ji)中,震蕩培養(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提取(qu)質(zhi)粒。
生長條件
LB +氨芐青霉(mei)素(su),37℃(克隆菌株Stbl3,9981bp)
存儲(chu)條件(jian)
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用(yong)領(ling)域
科研
共享(xiang)方式(shi)
公益性共享
