商品描述:
商品屬性
商品描述:
商品屬性
商品屬性:
產品名稱
pACYC177
英文名稱
pACYC177 plasmid
規格
質粒(li)干粉(fen)
貨號
BJ-J1193
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)粒(li)干(gan)粉后,請(qing)加入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)粒(li),室溫(wen)靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培養: 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)(ye)體(ti)培養基,37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩選培養: 將適當(dang)體(ti)積(ji)(100 µl)的復蘇細胞,涂(tu)布在相(xiang)應抗性的 LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務(wu)必干(gan)燥后), 倒置(zhi)(zhi)培養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單克(ke)隆菌(jun)落至相(xiang)應抗性 LB 液(ye)(ye)體(ti)培養基中,震(zhen)蕩(dang)培養 12-16h,根據(ju)試(shi)驗需(xu)要提取(qu)(qu)質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB+氨(an)芐青(qing)霉素(su),37℃(克隆菌株DH5α)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級(ji)
1
應用領域
質粒(li)載體
共享方式(shi)
公益性(xing)共(gong)享(xiang)
