商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pACYC184
英文名稱
pACYC184
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1194
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收到質粒干粉后(hou),請(qing)加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管底,溶解(jie)質粒,室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質粒): 200μl 感受態細胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱(re)激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang)(yang): 將(jiang)適(shi)當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布在相應抗性的(de) LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干燥(zao)后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至相應抗性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提(ti)取(qu)質粒。
生長條(tiao)件(jian)
LB +氯霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5a)
存儲條件(jian)
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科(ke)研
共享方式
公益(yi)性(xing)共享
