商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pAdEasy-1
英文名稱
pAdEasy-1
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1195
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后,請(qing)加(jia)(jia)入 20μl 無菌(jun)水(shui)至(zhi)管底,溶解(jie)質(zhi)粒(li)(li)(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感(gan)受態細(xi)(xi)胞 + 質(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜(mo)孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)(pei)養: 毎管加(jia)(jia) 800µl LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養: 將(jiang)適當體(ti)(ti)積(100 µl)的(de)(de)復(fu)蘇細(xi)(xi)胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗性(xing)的(de)(de) LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務(wu)必(bi)干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落(luo)至(zhi)相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養 12-16h,根據試驗(yan)需要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,33477bp)
存(cun)儲(chu)條件
2-8℃
安全(quan)等級
1
應用領域
科研
共享方式
公益性共享(xiang)
