商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBARGPE1
英文名稱
pBARGPE1 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1204
商品詳情
培(pei)養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干粉(fen)后,請加入 20μl 無(wu)菌水至管(guan)(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao)(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養: 毎管(guan)(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養: 將適當體積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細(xi)胞(bao)(bao),涂布在(zai)相應(ying)抗性(xing)的(de) LB 平板(ban)上,正(zheng)置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面(mian)務必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落。 7.提取: 挑取單(dan)克(ke)隆菌落至相應(ying)抗性(xing) LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,根據試驗需(xu)要(yao)提取質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB+氨芐青霉(mei)素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全等(deng)級
1
應用領域
質粒載體
共享方式(shi)
公益性共享
