商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBBR1MCS2-Tac-mCherry
英文名稱
pBBR1MCS2-Tac-mCherry
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1205
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解(jie): 收到質粒干(gan)粉(fen)后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至管底,溶解(jie)質粒,室(shi)溫(wen)靜置 1min; 2.混合(吸附質粒): 200μl 感受態細胞(bao) + 質粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜(mo)孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復(fu)(fu)培養: 毎(mei)管加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)培養基(ji),37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩選培養: 將適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)(fu)蘇細胞(bao),涂(tu)布在相應抗性(xing)的 LB 平(ping)(ping)板上,正置平(ping)(ping)皿 30min(瓊(qiong)脂面務(wu)必干(gan)燥后), 倒置培養 12-16h,出現(xian)菌(jun)落。 7.提取: 挑(tiao)取單克隆(long)菌(jun)落至相應抗性(xing) LB 液(ye)體(ti)培養基(ji)中,震蕩(dang)培養 12-16h,根(gen)據試(shi)驗需要提取質粒。
生長條(tiao)件
LB +卡納霉素,37℃(克(ke)隆(long)菌(jun)株DH5α,6195bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用(yong)領域
科研
共享方(fang)式
公益(yi)性共享
