商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBI121
英文名稱
pBI121
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1206
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)(li)干粉后(hou),請加入 20μl 無(wu)菌水至(zhi)管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體積(100 µl)的(de)(de)復蘇(su)細胞,涂布在相(xiang)應抗(kang)性的(de)(de) LB 平板上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必(bi)干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取: 挑取單克隆菌落(luo)至(zhi)相(xiang)應抗(kang)性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提取質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件
LB +卡那霉素,37℃(克隆菌(jun)株Stbl3/DH5α,14758bp)
存儲條(tiao)件(jian)
2-8℃
安全等級
1
應用(yong)領(ling)域(yu)
pBI121載體(ti)是一個雙元植物(wu)農桿菌表達載體(ti),能夠高效(xiao)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)植物(wu)。該載體(ti)來源于pB221和Bin19載體(ti)。載體(ti)上含有(you)從ColE1來源的ori復制元件,從CaMV中來源的pROK1元件,大腸桿菌新(xin)霉素磷酸(suan)轉(zhuan)(zhuan)移酶(mei)II基因(Neomycin phosphotransferase II Gene, NptII),新(xin)霉素抗(kang)(kang)性基因(Neomycin resistant gene, Neo), 敏感基因Beta葡糖苷酸(suan)酶(mei)(glucuronidase),Ter 農桿菌Ti 質粒(li)胭脂氨酸(suan)合成酶(mei)原件等。pBI121載體(ti)是卡那抗(kang)(kang)性質粒(li)
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