商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBI121-EGFP
英文名稱
pBI121-EGFP
規格
質(zhi)粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1207
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒(li)(li)(li)干(gan)粉(fen)后(hou)(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌水至管(guan)底,溶(rong)解質(zhi)粒(li)(li)(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感(gan)受態(tai)細胞 + 質(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上(shang)(shang)放(fang)置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體積(ji)(100 µl)的復蘇(su)細胞,涂(tu)布在(zai)相應(ying)抗性的 LB 平板上(shang)(shang),正(zheng)置(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干(gan)燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落(luo)至相應(ying)抗性 LB 液體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長(chang)條件
LB +卡那霉素,37℃(克隆(long)菌株Stbl3,13832bp)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
1
應(ying)用領域(yu)
科研
共享方式
公益性共享
