商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBluescript II-SK(+)
英文名稱
pBluescript II-SK(+)
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1210
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法(fa)
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加入 20μl 無(wu)菌(jun)水至管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附(fu)質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻(yun),冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗(kang)(kang)性的(de) LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務(wu)必干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌(jun)落至相(xiang)應抗(kang)(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提(ti)取質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件
LB+氨芐(xia)青霉素(su),37℃(克隆菌(jun)株DH5α,2961bp)
存儲(chu)條件(jian)
2-8℃
安全等(deng)級
0
應用(yong)領域
科研(yan)
共享方(fang)式(shi)
公益性共享
