商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBR322
英文名稱
pBR322 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1211
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后,請加入(ru) 20μl 無菌(jun)(jun)水至管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室(shi)溫靜(jing)置 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附(fu)質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao)(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10μl 混(hun)勻,冰(bing)上放置 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養: 毎管加 800μl LB 液體(ti)培(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養: 將適當(dang)體(ti)積(100 μl)的復(fu)蘇細(xi)胞(bao)(bao),涂布在(zai)相應(ying)抗性的 LB 平(ping)板上,正置平(ping)皿 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務必干(gan)燥后), 倒置培(pei)(pei)養 12-16h,出現菌(jun)(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至相應(ying)抗性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)養基(ji)中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養 12-16h,根(gen)據試驗需要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件(jian)
LB+氨芐青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α)
存儲(chu)條件
2-8℃
安(an)全等級
1
應用領域
質粒載體(ti),空載體(ti)
共享方式
公益性共享
