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pBR322





pBR322

  • 商品貨號:BJ-J1211
    商品庫存: 100
  • 商品品牌:邦景/BHBT
  • 上架時間:2023-07-10
    商品點擊數:235

商品描述:

商品屬性

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產品名稱

pBR322

 英文名稱

pBR322 plasmid

 規格

 質粒干粉

 貨號

BJ-J1211


商品詳情

培養基

酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)

傳代方法

1.溶解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后,請加入(ru) 20μl 無菌(jun)(jun)水至管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室(shi)溫靜(jing)置 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附(fu)質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao)(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10μl 混(hun)勻,冰(bing)上放置 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養: 毎管加 800μl LB 液體(ti)培(pei)(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養: 將適當(dang)體(ti)積(100 μl)的復(fu)蘇細(xi)胞(bao)(bao),涂布在(zai)相應(ying)抗性的 LB 平(ping)板上,正置平(ping)皿 30min(瓊脂(zhi)面(mian)務必干(gan)燥后), 倒置培(pei)(pei)養 12-16h,出現菌(jun)(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至相應(ying)抗性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)養基(ji)中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養 12-16h,根(gen)據試驗需要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。

生長條件(jian)

LB+氨芐青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α)

存儲(chu)條件

2-8℃

安(an)全等級

1

應用領域

質粒載體(ti),空載體(ti)

共享方式

公益性共享

 

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