商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pBV220
英文名稱
pBV220
規格
質(zhi)粒(li)干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1212
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解: 收到質(zhi)(zhi)粒(li)干粉后,請加入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受(shou)態細胞(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的(de)(de)復蘇細胞(bao),涂布在相應抗性(xing)的(de)(de) LB 平板上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必(bi)干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)(luo)。 7.提取: 挑取單(dan)克(ke)隆菌(jun)落(luo)(luo)至(zhi)相應抗性(xing) LB 液體培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要(yao)提取質(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條(tiao)件
LB +氨(an)芐青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α,3666bp)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研(yan)
共享方(fang)式
公益(yi)性共享
