商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pCAMBIA1301
英文名稱
pCAMBIA1301
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1214
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收到質粒(li)干(gan)粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管底,溶解質粒(li),室溫靜(jing)置 1min; 2.混(hun)合(吸附質粒(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布在(zai)相應抗(kang)性的(de) LB 平板上,正置平皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務必干(gan)燥(zao)后(hou)), 倒置培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提取: 挑取單克(ke)隆菌(jun)落(luo)至相應抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提取質粒(li)。
生長(chang)條件
LB +卡(ka)那霉素(su),37℃(克隆菌株Stbl3,11849bp)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
科研(yan)
共享方式
公益性(xing)共享
