商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pcDNA3 Flag-humanTRAF6 (1093)
英文名稱
pcDNA3 Flag-humanTRAF6 (1093)
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1218
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后,請(qing)加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管底,溶解質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li),室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導(dao)入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適當體積(100 µl)的復蘇細胞,涂布(bu)在相(xiang)應抗性的 LB 平(ping)板上(shang),正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必(bi)干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆菌(jun)落(luo)至相(xiang)應抗性 LB 液體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提取(qu)質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條(tiao)件
LB +氨芐青霉素,37℃(克(ke)隆(long)菌株DH5α,6974bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領(ling)域
科研
共享方式
公益性(xing)共享
