商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector
英文名稱
pcDNA3.1(+) CircRNA Mini Vector
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1219
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)(jun)水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室溫(wen)靜(jing)(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰(bing)(bing)上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養: 毎管(guan)加(jia) 800μl LB 液體(ti)培(pei)養基,37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選(xuan)培(pei)養: 將適(shi)當(dang)體(ti)積(100 μl)的復(fu)蘇細(xi)胞(bao),涂布在(zai)相應抗性的 LB 平板上,正(zheng)置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出(chu)現菌(jun)(jun)落。 7.提取(qu)(qu): 挑(tiao)取(qu)(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至相應抗性 LB 液體(ti)培(pei)養基中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗需要提取(qu)(qu)質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB +氨(an)芐青(qing)霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5a,5607bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用領域
科研(yan)
共(gong)享方式
公益性共享
