商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pcDNA-Ikkb-FLAG WT
英文名稱
pcDNA-Ikkb-FLAG WT
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1223
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解: 收(shou)到質粒(li)(li)干粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解質粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培養: 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液(ye)體培養基(ji),37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩選培養: 將適當(dang)體積(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂布在(zai)相應抗性的 LB 平板上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后(hou)), 倒(dao)置(zhi)培養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌(jun)落至(zhi)相應抗性 LB 液(ye)體培養基(ji)中,震蕩培養 12-16h,根據(ju)試驗(yan)需要提取質粒(li)(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐青霉素,37℃(克(ke)隆菌(jun)株DH5α,骨架5428bp+基因大(da)小)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研
共享方式
公益性共享
