商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pCMV-HA-Ub
英文名稱
pCMV-HA-Ub
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1225
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到(dao)質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)養: 毎(mei)管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞(bao),涂布在(zai)相應抗(kang)性的(de) LB 平板(ban)上,正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆(long)菌(jun)落至(zhi)相應抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗需要提取質(zhi)粒(li)(li)。
生長(chang)條件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克(ke)隆(long)菌株DH5α,3997bp)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研(yan)
共享方式
公益性共(gong)享(xiang)
