商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pCRE-Luc
英文名稱
pCRE-Luc
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1226
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法
1.溶(rong)解(jie): 收到質(zhi)粒(li)干粉后,請(qing)加入(ru) 20μl 無菌(jun)(jun)水至管底(di),溶(rong)解(jie)質(zhi)粒(li),室溫(wen)靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導(dao)入(ru): 42℃靜置 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇細胞(bao),涂布在相應抗(kang)性(xing)(xing)的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后), 倒置培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出(chu)現菌(jun)(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至相應抗(kang)性(xing)(xing) LB 液(ye)體培(pei)(pei)(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提取(qu)質(zhi)粒(li)。
生(sheng)長條件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克隆菌株(zhu)DH5α,5700bp)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等(deng)級
0
應用(yong)領域
科研
共(gong)享方(fang)式
公益性共享
