商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pCTCon2
英文名稱
pCTCon2
規格
質(zhi)粒(li)干粉
貨號
BJ-J1227
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶解: 收(shou)到(dao)質(zhi)粒(li)干粉(fen)后,請加入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管底,溶解質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受(shou)態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱(re)激導(dao)入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎(mei)管加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(ji)(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂布在(zai)相應抗(kang)性(xing)的 LB 平(ping)板上,正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒(dao)置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌(jun)落(luo)至相應抗(kang)性(xing) LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提(ti)取質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α,6456bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域(yu)
科研
共享方式
公益性共(gong)享(xiang)
