商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pEBB HA RelA
英文名稱
pEBB HA RelA
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1228
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解: 收(shou)(shou)到質(zhi)(zhi)粒(li)干(gan)粉后,請加入(ru)(ru) 20μl 無菌水(shui)至(zhi)管底(di),溶(rong)解質(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入(ru)(ru): 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)(shou)縮膜孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養: 毎管加 800µl LB 液體培(pei)(pei)養基,37 ℃培(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養: 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞(bao),涂(tu)布在相應抗性的 LB 平(ping)板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥(zao)后), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克(ke)隆菌落(luo)至(zhi)相應抗性 LB 液體培(pei)(pei)養基中,震蕩培(pei)(pei)養 12-16h,根據試驗需要(yao)提取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,7046bp)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等(deng)級(ji)
0
應用(yong)領(ling)域
科研
共享方式
公益性共享
