商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pEGFP-N1
英文名稱
pEGFP-N1
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1233
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質粒(li)干(gan)粉后,請加(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管底,溶解質粒(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)): 200μl 感(gan)受態細胞(bao) + 質粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰(bing)上放(fang)置(zhi) 30min; 3.熱(re)激導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔(kong): 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia) 800μl LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)(ti)積(ji)(100 μl)的復(fu)蘇細胞(bao),涂(tu)布在(zai)相應(ying)抗性的 LB 平(ping)板(ban)上,正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務(wu)必干(gan)燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現(xian)菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆菌(jun)落至(zhi)相應(ying)抗性 LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提取(qu)質粒(li)。
生長條件(jian)
LB +卡那青霉素,37℃(克隆菌株DH5a,4733bp)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等級
0
應(ying)用領(ling)域(yu)
科研
共(gong)享(xiang)方式
公益性共(gong)享(xiang)
