商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pEGFP-N3
英文名稱
pEGFP-N3
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1234
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒干粉后(hou),請加(jia)(jia)入 20μl 無菌水至管底,溶(rong)解質(zhi)粒,室溫靜置 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放(fang)置 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)培(pei)(pei)(pei)養: 毎(mei)管加(jia)(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養: 將適當體積(100 µl)的(de)復(fu)蘇(su)細胞,涂布(bu)在相(xiang)應抗性(xing)的(de) LB 平(ping)板上,正置平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒置培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單克隆菌落至相(xiang)應抗性(xing) LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基中(zhong),震(zhen)蕩培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,根據試驗需要提取(qu)(qu)質(zhi)粒。
生長(chang)條件
LB+卡那霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α,4729bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用領域
科研
共享方式
公益(yi)性共享
