商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pEnCMV-KRAS WT-3×FLAG
英文名稱
pEnCMV-KRAS WT-3×FLAG
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1237
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶解(jie): 收(shou)到質粒(li)干(gan)粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至(zhi)(zhi)管底,溶解(jie)質粒(li),室(shi)溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)): 200μl 感受(shou)態細胞(bao) + 質粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養: 毎管加(jia) 800μl LB 液(ye)體培(pei)養基,37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當體積(100 μl)的復蘇細胞(bao),涂(tu)布在相應抗性的 LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必(bi)干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養 12-16h,出現(xian)菌落。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌落至(zhi)(zhi)相應抗性 LB 液(ye)體培(pei)養基中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗(yan)需要提(ti)取質粒(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐(xia)青霉素(su),37℃(克(ke)隆菌株(zhu)DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
1
應用領(ling)域(yu)
科(ke)研
共享方式
公益(yi)性共享
