商品描述:
商品屬性
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產品名稱
PESC-HIS
英文名稱
PESC-HIS
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1240
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后(hou)(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇細(xi)胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗(kang)性的 LB 平(ping)板上(shang),正置(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取: 挑取單(dan)克隆菌(jun)落至相(xiang)應(ying)抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提(ti)取質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨(an)芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,6706bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
0
應用領(ling)域
科研(yan)
共享方式
公(gong)益性共享
