商品描述:
商品屬性
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產品名稱
PESC-LEU
英文名稱
PESC-LEU
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1241
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解: 收(shou)到質粒(li)干(gan)粉后(hou),請加(jia)(jia)入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管底,溶(rong)解質粒(li),室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附(fu)質粒(li)): 200μl 感受態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang): 毎管加(jia)(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)養(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相應抗性的 LB 平(ping)板上(shang)(shang),正置(zhi)平(ping)皿(min) 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面(mian)務必干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆菌(jun)落至(zhi)相應抗性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震(zhen)蕩(dang)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提(ti)取(qu)質粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉(mei)素,37℃(克隆(long)菌(jun)株DH5α,7758bp)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用(yong)領域
科研
共享方式
公益(yi)性共(gong)享(xiang)
