商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET20b-T7-MCS-2×linker-mCherry-6×His
英文名稱
pET20b-T7-MCS-2×linker-mCherry-6×His
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1243
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)粒(li)干粉后(hou)(hou),請加入(ru) 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱(re)激(ji)導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)(fu)培養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培養(yang)基(ji),37 ℃培養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang): 將適(shi)當體(ti)積(100 µl)的復(fu)(fu)蘇細胞(bao),涂布在(zai)相(xiang)應抗性的 LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培養(yang) 12-16h,出現(xian)菌落。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌落至相(xiang)應抗性 LB 液體(ti)培養(yang)基(ji)中,震蕩培養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提(ti)取質(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用(yong)領(ling)域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:空載體,基因類型:ORF,原核抗性:Amp,熒光蛋白:紅色。
共享方式
公(gong)益性共享
