商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-21d
英文名稱
pET-21d
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1245
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶解(jie): 收到質(zhi)粒干粉后,請加入 20μl 無菌水(shui)至管底,溶解(jie)質(zhi)粒,室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎管加 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang): 將適(shi)當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂(tu)布在相應抗性的 LB 平板上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必(bi)干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取: 挑取單克隆(long)菌落(luo)至相應抗性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據(ju)試驗(yan)需要提取質(zhi)粒。
生長條件
LB +氨芐青(qing)霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5α)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:空載體,基因類型:ORF,原核抗性:Amp,熒光蛋白:未知。
共享(xiang)方式
公益性(xing)共(gong)享
