商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET22b-EBFP
英文名稱
pET22b-EBFP
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1246
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管(guan)底(di),溶(rong)解質(zhi)粒(li)(li),室(shi)溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao)(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)養(yang)(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇細(xi)胞(bao)(bao),涂布在(zai)相應抗性的 LB 平板上,正(zheng)置(zhi)平皿 30min(瓊脂面(mian)務必干燥后), 倒(dao)置(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現(xian)菌(jun)落(luo)。 7.提取: 挑(tiao)取單克(ke)隆菌(jun)落(luo)至相應抗性 LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗(yan)需(xu)要提取質(zhi)粒(li)(li)。
生(sheng)長條件
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克隆(long)菌株DH5α,6177bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級(ji)
0
應用領域
科(ke)研
共享(xiang)方式
公益性共享
