商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET22b-EGFP質粒
英文名稱
pET22b-EGFP質(zhi)粒
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1247
商品詳情
培(pei)養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法
1.溶解: 收(shou)(shou)到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至(zhi)管底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li)(li),室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上(shang)放置 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置 90s; 4.收(shou)(shou)縮膜(mo)孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)養基,37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇(su)細胞,涂布(bu)在相應抗(kang)性的 LB 平(ping)板上(shang),正置平(ping)皿 30min(瓊脂(zhi)面務必(bi)干(gan)燥后(hou)), 倒置培(pei)養 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌落(luo)至(zhi)相應抗(kang)性 LB 液體培(pei)養基中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據(ju)試驗(yan)需(xu)要提(ti)取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB +氨芐青(qing)霉(mei)素,37℃(克(ke)隆菌株(zhu)DH5α,6177bp)
存(cun)儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
0
應(ying)用領域
科研(yan)
共享方式
公益性共享(xiang)
