商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET28a-6×His-GZMB(human)
英文名稱
pET28a-6×His-GZMB(human)
規格
質(zhi)粒(li)干粉(fen)
貨號
BJ-J1249
商品詳情
培(pei)養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)(zhi)粒(li)干粉后(hou)(hou),請(qing)加入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li),室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞(bao) + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置 90s; 4.收縮(suo)膜(mo)孔: 冰浴(yu) 2min; 5.修復培養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang)(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復蘇(su)細(xi)胞(bao),涂布在相(xiang)(xiang)應抗(kang)(kang)性的 LB 平(ping)板上(shang),正置平(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)(hou)), 倒置培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆(long)菌落至相(xiang)(xiang)應抗(kang)(kang)性 LB 液(ye)體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩(dang)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據試(shi)驗需要提取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)。
生(sheng)長條件
LB +卡(ka)那霉素,37℃(克隆菌株(zhu)DH5α,744bp)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:大腸桿菌,基因類型:人,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共享方式(shi)
公益性共享(xiang)
