商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET28a-Cas9-Cys
英文名稱
pET28a-Cas9-Cys
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1251
商品詳情
培養(yang)基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收(shou)到質粒(li)干粉(fen)后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管底,溶解質粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質粒(li)): 200μl 感(gan)受(shou)態(tai)細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗性的 LB 平板(ban)上,正(zheng)置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現(xian)菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應抗性 LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩(dang)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要(yao)提取質粒(li)。
生(sheng)長條件
LB +卡那霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α,4308bp)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:未知,基因種屬:未知,基因類型:Cas9,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共享(xiang)方式(shi)
公益性共享
