商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET28a-FTH1(human)
英文名稱
pET28a-FTH1(human)
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1252
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶解: 收到質粒干(gan)粉后(hou)(hou),請加入 20μl 無菌(jun)(jun)水至管底,溶解質粒,室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒): 200μl 感受態細(xi)(xi)胞(bao) + 質粒 DNA 5~10μl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱(re)激導(dao)入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜(mo)孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培養(yang)(yang)(yang): 毎管加 800μl LB 液體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang)(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 μl)的復(fu)蘇細(xi)(xi)胞(bao),涂布(bu)在相應抗性(xing)(xing)的 LB 平板(ban)上(shang),正(zheng)置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后(hou)(hou)), 倒(dao)置(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)(jun)落(luo)(luo)。 7.提(ti)取: 挑取單克(ke)隆(long)菌(jun)(jun)落(luo)(luo)至相應抗性(xing)(xing) LB 液體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基中,震蕩培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提(ti)取質粒。
生長條件
LB +卡那(nei)霉素,37℃(克隆菌株DH5α,549bp)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等(deng)級
0
應用領(ling)域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:人,基因類型:ORF,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共享方式
公益性共享
