商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET28a-PRMT5(human)
英文名稱
pET28a-PRMT5(human)
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1257
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解(jie)(jie): 收(shou)到(dao)質(zhi)(zhi)粒(li)干(gan)粉后(hou),請加入(ru) 20μl 無菌水至(zhi)管(guan)底(di),溶(rong)解(jie)(jie)質(zhi)(zhi)粒(li),室(shi)溫靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(he)(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)(bing)上放置(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰(bing)(bing)浴 2min; 5.修復(fu)(fu)培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)養(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(ji)(100 µl)的(de)復(fu)(fu)蘇細胞,涂布(bu)在相(xiang)(xiang)應抗性的(de) LB 平板上,正置(zhi)(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面務(wu)必干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆(long)菌落(luo)至(zhi)相(xiang)(xiang)應抗性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提取(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)。
生長條件
LB +卡(ka)那霉素,37℃(克隆(long)菌(jun)株DH5α,1911bp)
存儲條件(jian)
2-8℃
安(an)全等級
0
應用領(ling)域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:人,基因類型:ORF,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共(gong)享方式
公益(yi)性共享(xiang)
