商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET28a-SCD1(mouse)-6×His(2同義突變)
英文名稱
pET28a-SCD1(mouse)-6×His
規格
質粒干(gan)粉(fen)
貨號
BJ-J1258
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶解(jie): 收(shou)到質粒(li)干粉后(hou),請加(jia)(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)水至(zhi)(zhi)管(guan)底(di),溶解(jie)質粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)): 200μl 感(gan)受態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia)(jia) 800µl LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)(ti)積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗性的(de) LB 平板上,正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面務必干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至(zhi)(zhi)相(xiang)應抗性 LB 液體(ti)(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提取(qu)質粒(li)。
生長(chang)條件
LB +卡那霉素(su),37℃(克(ke)隆菌(jun)株DH5α,1065bp)
存儲(chu)條件(jian)
2-8℃
安(an)全等(deng)級
0
應用領(ling)域(yu)
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:小鼠,基因類型:ORF,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共享(xiang)方式
公益性共享
