商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET28a-VAMP1(human)(1同義突變)
英文名稱
pET28a-VAMP1(human)
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1262
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒(li)(li)干(gan)粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌(jun)(jun)水至管底,溶(rong)解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)養(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)養(yang): 將適當體積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞(bao),涂布在相(xiang)應抗(kang)性的(de) LB 平(ping)板上,正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊脂面(mian)務(wu)必干(gan)燥(zao)后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出(chu)現菌(jun)(jun)落。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克(ke)隆菌(jun)(jun)落至相(xiang)應抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提(ti)取(qu)質(zhi)粒(li)(li)。
生(sheng)長(chang)條件(jian)
LB +卡(ka)那霉素,37℃(克隆菌株DH5α,351bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:人,基因類型:ORF,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共享方式
公益性共享(xiang)
