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pET28b-T7-Cas9-6×His





pET28b-T7-Cas9-6×His

  • 商品貨號:BJ-J1265
    商品庫存: 100
  • 商品品牌:邦景/BHBT
  • 上架時間:2023-07-10
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商品描述:

商品屬性

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產品名稱

pET28b-T7-Cas9-6×His

 英文名稱

pET28b-T7-Cas9-6×His

 規格

 質粒干粉(fen)

 貨號

BJ-J1265


商品詳情

培養基

酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)

傳代方(fang)法(fa)

1.溶解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)(li)干(gan)粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)(jun)水至(zhi)管底,溶解質(zhi)粒(li)(li)(li),室溫(wen)靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎(mei)管加(jia) 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相應(ying)抗性(xing)的 LB 平板上(shang),正置(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干(gan)燥后), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至(zhi)相應(ying)抗性(xing) LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗(yan)需要提取(qu)質(zhi)粒(li)(li)(li)。

生長條(tiao)件(jian)

LB +卡那霉素,37℃(克隆(long)菌株(zhu)DH5α)

存儲條件

2-8℃

安全(quan)等級

0

應用領域

載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:未知,基因類型:CRISPR,Cas9,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。

共享方式

公(gong)益性共享

 

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