商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET30a-His6-LOXCAT(140084)
英文名稱
pET30a-His6-LOXCAT(140084)
規格
質(zhi)粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1266
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方(fang)法(fa)
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)干粉(fen)后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解質(zhi)粒(li),室(shi)溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放(fang)置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液體培養(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang)(yang)(yang): 將適當(dang)體積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗性的(de) LB 平(ping)(ping)板(ban)上(shang),正(zheng)置(zhi)(zhi)平(ping)(ping)皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提(ti)取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單克隆菌落至相(xiang)應抗性 LB 液體培養(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩(dang)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提(ti)取(qu)(qu)質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件
LB +卡那(nei)霉素,37℃(克隆菌(jun)株(zhu)DH5α,3600bp)
存儲條件
2-8℃
安全等(deng)級(ji)
0
應(ying)用領域(yu)
載體宿主:大腸桿菌,載體用途:蛋白表達,基因種屬:大腸桿菌,基因類型:ORF,原核抗性:Kan,熒光蛋白:未知。
共(gong)享方(fang)式
公益性(xing)共享(xiang)
