商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pet-32a
英文名稱
pet-32a
規格
質粒干粉(fen)
貨號
BJ-J1267
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶解: 收到質粒(li)干粉后,請加入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解質粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質粒(li)): 200μl 感受態細胞 + 質粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將(jiang)適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細胞,涂布在相應(ying)抗性的(de) LB 平(ping)(ping)板上(shang),正置(zhi)(zhi)平(ping)(ping)皿 30min(瓊脂(zhi)面務(wu)必(bi)干燥后), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)養(yang) 12-16h,出現(xian)菌落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌落至相應(ying)抗性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提取(qu)質粒(li)。
生長條(tiao)件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α,5900bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等(deng)級
0
應用領域
科研
共享方(fang)式
公益性共(gong)享
