商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-E-protein質粒
英文名稱
pET-32a(+)-E-protein plasmid
規格
質粒(li)干粉
貨號
BJ-J1268
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收到(dao)質(zhi)(zhi)粒干粉(fen)后,請(qing)加入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管底,溶解質(zhi)(zhi)粒,室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體積(100 µl)的復蘇細胞,涂布(bu)在相(xiang)應抗(kang)性的 LB 平板上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后), 倒置(zhi)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取: 挑取單克隆菌(jun)落(luo)至相(xiang)應抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據(ju)試驗需要提(ti)取質(zhi)(zhi)粒。
生長(chang)條件
LB+氨芐青霉(mei)素,37℃,克隆菌株BL21(DE3)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安(an)全等級
1
應(ying)用(yong)領域
質粒載體
共享方式
公益性共享
