商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-NSP10質粒
英文名稱
pET-32a(+)-NSP10 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1269
商品詳情
培養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干粉后(hou)(hou),請加入 20μl 無菌水至管(guan)(guan)底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱(re)激導入: 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰(bing)(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復培養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)(guan)加 800µl LB 液體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培養(yang)(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)(de)復蘇細胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗性(xing)的(de)(de) LB 平板上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務(wu)必干燥(zao)后(hou)(hou)), 倒置(zhi)培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提取: 挑取單(dan)克隆菌落(luo)至相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液體(ti)培養(yang)(yang)(yang)基中(zhong),震(zhen)蕩培養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質(zhi)粒(li)(li)。
生長條件(jian)
LB+氨芐青霉素,37℃,克隆菌(jun)株(zhu)BL21(DE3)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全(quan)等級
1
應用領域(yu)
質(zhi)粒載體
共享方式
公益性共(gong)享
