商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-NSP16質粒
英文名稱
pET-32a(+)-NSP16 plasmid
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1270
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法
1.溶(rong)解(jie): 收到質(zhi)(zhi)粒干粉后,請加入(ru)(ru) 20μl 無菌(jun)水(shui)至管底(di),溶(rong)解(jie)質(zhi)(zhi)粒,室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質(zhi)(zhi)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置 30min; 3.熱激導(dao)入(ru)(ru): 42℃靜置 90s; 4.收縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞,涂(tu)布在相應抗性的(de) LB 平板上(shang),正置平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干燥后), 倒置培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現(xian)菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落(luo)至相應抗性 LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提(ti)取(qu)質(zhi)(zhi)粒。
生長條件(jian)
LB+氨芐青霉素,37℃,克(ke)隆(long)菌(jun)株BL21(DE3)
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用領(ling)域
質粒載體
共(gong)享(xiang)方式
公益性共享(xiang)
