商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pET-32a(+)-NSP1質粒
英文名稱
pET-32a(+)-NSP1 plasmid
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1271
商品詳情
培(pei)養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶(rong)解(jie): 收(shou)到質粒(li)(li)干(gan)粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至管底,溶(rong)解(jie)質粒(li)(li),室溫靜(jing)置 1min; 2.混合(吸附質粒(li)(li)): 200μl 感受(shou)態細胞 + 質粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上放(fang)置 30min; 3.熱激導入: 42℃靜(jing)置 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適(shi)當體積(100 µl)的復蘇細胞,涂布在(zai)相應(ying)抗(kang)性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務必干(gan)燥后), 倒置培(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落至相應(ying)抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)養基(ji)中,震蕩(dang)培(pei)養 12-16h,根據(ju)試驗需要提取(qu)質粒(li)(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB+氨芐青霉(mei)素,37℃,克(ke)隆菌株BL21(DE3)
存(cun)儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
質粒載(zai)體
共享方(fang)式
公益性共享
